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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15201736385

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            諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)50T

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2020-09-29 11:27:38瀏覽次數(shù):393次

            聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)
            CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
            分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            貨號(hào) YSP7017 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
            諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

            產(chǎn)品及特點(diǎn):
            1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
            2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
            3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
            4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
            5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
            本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
            參數(shù)規(guī)格:
            產(chǎn)品名稱:諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
            英文名稱:Nocardia spp.
            產(chǎn)品規(guī)格:50T
            產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
            產(chǎn)品保存:-20℃保存
            產(chǎn)品有效期:一年
            產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
            運(yùn)輸及保存
            低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
            自備試劑
            DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
            使用方法:
            一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
            1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
            2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
            3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
            4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
            5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
            6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
            7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
            二、樣品DNA的制備
            8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
            9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
            三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
            10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
            11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。

            實(shí)驗(yàn)過程:
            一、諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
            1. DNA模板
            2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
            3.10×PCR Buffer
            4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
            5.Taq酶
            二、操作步驟
            1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
                  10×PCR buffer             5μl
                  dNTP mixl                 4μl
                  引物1(10pM)               2μl
                  引物2(10PM)              2μl
                  Taq酶(2U/μl)            1μl
                  DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
                 加ddH2O至               50 μl
                 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
            2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
            3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
            4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
            以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
            Bergenin游離睪檢測(cè)試劑盒50mg

            鹽阿米洛利  英文名稱:Amiloride hydrochloride   保存:-20℃   規(guī)格:50mg 轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體

            胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)*100(g)

            Tie1(Human tyrosine kinase with immunoglobulinlike and EGFlike domains 1) ELISA kit  人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)子樣域酪氨激酶1CAS號(hào):107211硫氧還蛋白還原酶檢測(cè)試盒1gHuman/人Elisa試盒3073878

            Proanthocyanidins游離狀腺素檢測(cè)試劑盒20mg

            北豆根 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 1g 脂酰基醇蛋白聚糖2抗體 DAG1 ELISA Kit 肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)ELISA試劑盒

            胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 KEAP1 / INRF2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)*250(g)

            ANG2(Human Angiopoietin 2) ELISA Kit  人血管生成素2CAS號(hào):1071289δ氨基酰檢測(cè)試盒5gHuman/人Elisa試盒30748471

            6TAMRA 亞酰5mg

            熊果;Ursolic acid 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg BRPF3蛋白抗體 LFA-2/CD2 ELISA Kit 淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒

            Bile powder of cowBR,40%細(xì)螺旋體病檢測(cè)試盒20mgβ內(nèi)啡肽檢測(cè)試盒Interferonγ

            6TAMRA CPG *1000 Å*5mg

            金絲桃苷;Hyperoside 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢 RL95-2(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

            Bile powder of pigBRN基D天冬氨檢測(cè)試盒20mgγ干擾素檢測(cè)試盒γglutamyltranspeptidase

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            諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒蘇木素 CAS號(hào): 517282 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            商陸皂苷元 CAS號(hào): 1802126 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            R三七皂苷R2 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

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            2OalphaL鼠李喃糖甙鳶尾 CAS號(hào): 943989682 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            尚含雞納甙 CAS號(hào): 53516737 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            雙草鹽 CAS號(hào): 625047 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

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            三十 CAS號(hào): 593500 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            Ⅳ CAS號(hào): 85836 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            Ⅲ CAS號(hào): 85869 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            Ⅱ CAS號(hào): 3118976 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            三聚 CAS號(hào): 108781 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購(gòu)|咨詢

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