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            上海研生實業(yè)有限公司
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            納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號50T

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2020-09-29 11:12:21瀏覽次數(shù):316次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
            分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            貨號 YSP6995 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
            納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。

            實驗過程:
            一、納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
            1. DNA模板
            2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
            3.10×PCR Buffer
            4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
            5.Taq酶
            二、操作步驟
            1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
                  10×PCR buffer             5μl
                  dNTP mixl                 4μl
                  引物1(10pM)               2μl
                  引物2(10PM)              2μl
                  Taq酶(2U/μl)            1μl
                  DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
                 加ddH2O至               50 μl
                 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
            2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
            3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
            4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
            參數(shù)規(guī)格:
            產(chǎn)品名稱:納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒
            英文名稱:Naegleria spp.·
            產(chǎn)品規(guī)格:50T
            產(chǎn)品運輸:低溫運輸
            產(chǎn)品保存:-20℃保存
            產(chǎn)品有效期:一年
            產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
            運輸及保存
            低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
            自備試劑
            DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
            本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

            ?
            產(chǎn)品及特點:
            1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
            2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
            3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
            4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
            5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
            以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
            98%100g25g環(huán)桑素120832matrix metalloproteinase 9

             半胱氨蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cystatin 3 (CST3)

            Diosgenin氨基基烯鹽共聚物標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:血管緊張素1(Angiotensin-1)CLIA試劑盒 0.2ml

            hFABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit  人心型脂肪結(jié)合蛋白CAS號:952 淀粉檢測試盒2500uHuman/人Elisa試盒3061889

            98%25g100g桑根K513359matrix metalloproteinase 8

            芹糖異甘草苷;異甘草苷芹糖 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Isoliquiritin apioside

            蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 Statherin / STATH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*250(g)

            人調(diào)節(jié)活化蛋白(Rantes)BEND6  BEND6蛋白抗體規(guī)格:96T/48TAminosalicylic Acid規(guī)格:50mgDeltalike ligand 1檢測試盒20mg人黑色素瘤細胞,MV3細胞1x10^6cells

            97%100g500g乳脫酶(LDH)檢測試劑盒(LDL比色法)6sulfatoxymelatonin

            位庚內(nèi)酯(Standard for GC ,>98.5%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC ,>98.5%(GC) γ-Heptalactone

            Malt extractBR型肝炎病X抗原檢測試盒5mgⅡ型膠原C端肽檢測試盒CollagenTypeⅢ

            ≥98%5g25g乳脫酶(LDH)檢測試劑盒(LDL微板法)sCD14ST presepsin

             志賀氏增菌肉湯 規(guī)格: 250g 用途: 用于志賀氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。(GB4789.5-2010)

            Malt extractBR透明質(zhì)合酶1檢測試盒5mgⅢ型膠原檢測試盒NterminalprocollagenⅢpropeptide

            98%1g100g乳脫酶(LDH)檢測試劑盒(LDL微板法)measlesvirus IgM

            (+)-葑(standard for GC, ≥99.5% (GC)) 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC, ≥99.5% (GC) (+)-Fenchone

            NonfatDried Milk蛋白組級透明質(zhì)合酶3檢測試盒5mgⅢ型前膠原氨基N端肽檢測試盒CollagenTypeⅣ
            納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒異紫花前胡內(nèi) CAS號: 13849086 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            慈溪麥冬皂苷A CAS號: 288143271 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            麥冬苷元3OαL喃鼠李糖( CAS號: 128502943 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            葛根素6″O木糖苷 CAS號: 114240185 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            連翹苷E CAS號: 93675888 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            葛根素芹菜糖苷 CAS號: 103654508 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            西伯利亞遠志糖A6 CAS號:  規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢

            西伯利亞遠志口山B CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            酰升麻3OαL阿拉伯糖苷 CAS號: 402513886 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            Cimiracemoside D CAS號: 290821395 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            瓜子金皂苷V CAS號: 162857650 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢

            五味子 CAS號: 64917835 規(guī)格: HPLC≥97%;20mg 訂購|咨詢

            西伯利亞遠志糖A5 CAS號: 107912970 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            牡丹皮苷C CAS號: 172760031 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            酰氧芍藥苷 CAS號: 72896403 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
            使用方法:
            一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
            1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
            2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
            3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
            4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
            二、樣品DNA的制備
            8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
            9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
            三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
            10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
            11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

             

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