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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15201736385

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            星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)50T

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2020-09-29 11:22:57瀏覽次數(shù):368次

            聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)
            CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
            分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            貨號(hào) YSP7011 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
            星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

            參數(shù)規(guī)格:
            產(chǎn)品名稱:星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒
            英文名稱:Nocardia asteroides
            產(chǎn)品規(guī)格:50T
            產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
            產(chǎn)品保存:-20℃保存
            產(chǎn)品有效期:一年
            產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
            運(yùn)輸及保存
            低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
            自備試劑
            DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
            產(chǎn)品及特點(diǎn):
            1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
            2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
            3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
            4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
            5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
            本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

            ?
            實(shí)驗(yàn)過程:
            一、星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
            1. DNA模板
            2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
            3.10×PCR Buffer
            4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
            5.Taq酶
            二、操作步驟
            1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
                  10×PCR buffer             5μl
                  dNTP mixl                 4μl
                  引物1(10pM)               2μl
                  引物2(10PM)              2μl
                  Taq酶(2U/μl)            1μl
                  DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
                 加ddH2O至               50 μl
                 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
            2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
            3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
            4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
            使用方法:
            一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
            1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對(duì)照。
            2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
            3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
            4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
            5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
            6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
            7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
            二、樣品DNA的制備
            8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
            9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
            三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
            10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
            11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。
            以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
            Betaine鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白檢測試劑盒20mg

            辛弗林(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Synephrine

            17-羥孕(17-OHP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)*1000(g)

            人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)PhosphoTrkA (Ser791)  化酪氨激酶A抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:1gE選擇素檢測試盒10mg人狀腺癌細(xì)胞,F(xiàn)TC133細(xì)胞1x10^6cells

            98%25g1g白花前胡香豆精I(xiàn)58151Chitinase 3like Protein 1

             人腺細(xì)胞英文名稱:MX-1

            雌三醇(E3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 S100A4 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

            人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)AGPHD1  氨基糖苷類結(jié)構(gòu)域蛋白抗體規(guī)格:96T/48TAmobarbital CII規(guī)格:1gFK506結(jié)合蛋白52檢測試盒20mg人狀腺癌細(xì)胞,K1細(xì)胞1x10^6cells

            魯斯可皂苷元Cy3 亞酰5mg

            6,7-二基香豆  英文名稱:6, 7- two methoxy coumarin   保存:-20℃   規(guī)格:20mg 化蛋白激酶C亞性抗體

            無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5檢測試盒20mgP物質(zhì)檢測試盒PSelectin

            6JOE 亞酰5mg

            姜黃素  英文名稱:Curcumin   保存:-20℃   規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體

            CDCABR,98%腺苷脫氨酶1檢測試盒20mgP選擇素檢測試盒ArgGlyAsp

            去基異波爾定6ROX 亞酰5mg

            蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品 Plumbagin 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeJAR(人胎盤絨毛膜細(xì)胞)

            腺苷脫氨酶1檢測試盒20mgRGD三肽檢測試盒Solubleprotein100B
            星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒異橙黃 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            月桂卓 CAS號(hào): 59227893 規(guī)格: HPLC≥98%;0.1ml 訂購|咨詢

            油 CAS號(hào): 112801 規(guī)格: 鑒別;0.1ml 訂購|咨詢

            鹽伊立替康 CAS號(hào): 100286906 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            愈創(chuàng)木 CAS號(hào): 32994 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            氧石蒜堿 CAS號(hào): 72510044 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            鹽白屈菜紅堿 CAS號(hào): 3895929 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            銀杏 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            野菊花內(nèi) CAS號(hào): 62687223 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

            2O酰山椒子 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

            柚皮素7O葡萄糖醛苷 CAS號(hào): 158196340 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

            茵芋堿 CAS號(hào): 83954 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            酰蝙蝠葛蘇林堿 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

            一葉萩堿 CAS號(hào): 5610402 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            蕓苔素內(nèi) CAS號(hào): 72962437 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

             

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