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更新時間:2022-03-21 20:58:44瀏覽次數(shù):243次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YS-02X9875 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產品名稱:大鼠骨髓瘤細胞;IR983F
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9875
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
WNK4/FITC 熒光素標記一種新的絲/蘇激酶家族成員的基因WNK4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
血管緊張素轉換酶2抗體 ACE2 0.1ml
phospho-14-3-3 beta + zeta (Ser186) 英文名稱: 磷酸化14-3-3 β/ζ抗體 0.1ml
Phospho-EEF2 (Thr56 + Thr58) 英文名稱: 磷酸化真核翻譯延長因子2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化細絲蛋白A抗體 規(guī)格 0.1ml
CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TM(Thrombomodulin) 血栓調節(jié)蛋白多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CACH2/CaV1.2 L型鈣通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Pdk4 丙酮酸脫氫酶激酶4抗體 規(guī)格 0.1ml
Calcitonin (CT)降鈣素 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Tenascin C 英文名稱: 細胞粘合素(固生蛋白)抗體 0.1ml
CENPA 英文名稱: 著絲粒蛋白A 0.1ml
CACH2/CaV1.2 L型鈣通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Goat rabbit IgG/Cy5 Cy5標記的羊抗兔IgG 0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr599) 英文名稱: 磷酸化FMS樣酪酸激酶3抗體 0.1ml
促卵泡刺受體抗體 FSH-R 0.2ml
PAK1/FITC 熒光素標記p21激活激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-STAT1 (Ser727) 磷酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Mouse IgM 羊抗小鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
大鼠骨髓瘤細胞;IR983F凍切片細胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒,
石蠟切片細胞細胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠鈣調磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒,
載玻片細胞有絲分裂NBT顯色檢測試劑盒10/20次大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒,
凍切片細胞有絲分裂NBT顯色檢測試劑盒10/20次大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒,
石蠟切片細胞有絲分裂NBT顯色檢測試劑盒10/20次豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒,
簡易細胞核形態(tài)染色試劑專題雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒,
名稱規(guī)格雞腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒,
HOECHST33342簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒100次雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒,
HOECHST33342/PI簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒100次雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒,
吖啶橙簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒100次鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒,
PROPIDIUM IODIDE簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒100次綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒,
DAPI簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒100次兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA試劑盒,
ETHIDIME BROMIDE簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒100次兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒,
羅丹明123簡易細胞核外形態(tài)染色試劑盒100次兔半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒,
HOECHST33258簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒100次兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒,
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