神經(jīng)干細胞體外分化研究是神經(jīng)科學研究領域的熱點。
有人觀察了不同濃度胎牛血清對神經(jīng)干細胞分化的影響。具體做法是:分離大鼠海馬區(qū)組織,制成單細胞懸液后,加入適量培養(yǎng)基((含bFGF10 ng/mL、EGF 20 ng/mL HEPES 5 mmol/LHeparin 5mg/mL、葡萄糖23.33 mmol/L、Glutamax3 mmol/L、1%B27的DMEM/F12培養(yǎng)基))培養(yǎng),并行Nestin染色,陽性者為神經(jīng)干細胞。
將第三代神經(jīng)干細胞分為三個組, A、B、C組細胞培養(yǎng)基除FBS濃度不同(分別為5%、1%、0)外,其余成分均一致(F12、1%N2、1%雙抗、1%谷氨酰胺)。培養(yǎng)第4天和第8天取細胞進行觀察,并采用胞核染色和免疫組化染色,以及檢測GFAP、βIII-Tubulin mRNA表達情況。
結果顯示,培養(yǎng)第4天至第8天,GFAP逐漸減弱,βIII-Tubulin逐漸增強。mRNA結果顯示,在第4天和第8天時,血清濃度越高,GFAP表達越高,βIII-Tubulin表達越低。(參考文獻見《中國修復重建外科雜志》2018年2月第32卷第2期《血清對神經(jīng)干細胞分化的影響》)
GFAP是神經(jīng)膠質細胞標記物,βIII-Tubulin是神經(jīng)元標志物。該結果表明,高濃度胎牛血清會促進神經(jīng)干細胞向神經(jīng)膠質細胞分化。而如果需要干細胞向神經(jīng)元分化,則需要采用低濃度血清。
關于胎牛血清的特點,下面以Ausbian細胞治療胎牛血清為例,略加說明。
該血清系對Ausbian進口特級胎牛血清進行γ射線照射,以滅活各種動物血清中潛在的病毒風險,提高安全性。極利于細胞的生長和傳代 。
每個批號血清均具有完整的檢驗報告,輻照報告。三次0.1 µm無菌過濾處理進行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協(xié)會要求。
Ausbian進口特級胎牛血清內(nèi)毒素低,小于3Eu/ml,可以使細胞更健康。對于客戶做實驗更加順利。如果選取內(nèi)毒素較高的血清,細胞一直泡在毒液里,短期內(nèi)試不出結果,用不健康的細胞做實驗,對實驗結果造成嚴重影響。
而且同一個批次數(shù)量多,2000瓶,可以長期不用換批次。保證了實驗更加順利的同時,節(jié)省了試用的時間和成本。
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