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9牛血清的質(zhì)量要求
（一）WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求
1. 牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家，并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。
2.有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自沒(méi)有用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料喂養(yǎng)的牛群。
3.要能證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。
4.血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌，保證無(wú)菌。
5.無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國(guó)家要求無(wú)大腸桿菌噬菌體污染。
6.要求血清對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。
我國(guó)在對(duì)牛血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)最早在2000年版《中國(guó)生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》中提出。包括物理性狀、總蛋白，血紅蛋白、細(xì)菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)毒素，支持細(xì)胞增殖檢查。2005版藥典頒布之后，小牛血清質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)被納入《中國(guó)藥典》2005年版 第三部 生物制品分冊(cè)。
科研實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好，就要用好血清，如Ausbian®特級(jí)胎牛血清，它適合各種細(xì)胞培養(yǎng)，尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞，如：干細(xì)胞、肝細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞，原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。
有下列情況者，對(duì)血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選：
1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí)，干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí)，干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過(guò)提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。
2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí)，過(guò)高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。
3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài)，任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑，都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘，謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí)，選擇極低的內(nèi)毒素（最好≤1EU/ml），對(duì)實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要；
4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染，或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增，這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此，挑選更低的內(nèi)毒素，是保證實(shí)驗(yàn)順利的第一步。
5.實(shí)驗(yàn)室有些細(xì)胞，需要長(zhǎng)期培養(yǎng)、長(zhǎng)期凍存，或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的，血清會(huì)經(jīng)?；蜷L(zhǎng)時(shí)間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康，都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清，以避免內(nèi)毒素長(zhǎng)久對(duì)細(xì)胞的毒性影響。
總之，血清中內(nèi)毒素含量過(guò)高，更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”，造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn)，或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡，導(dǎo)致試驗(yàn)中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。
細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)會(huì)均依據(jù)內(nèi)毒素對(duì)血清的品質(zhì)進(jìn)行分級(jí)和命名。
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