狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

            | 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

            13810524913

            technology

            首頁   >>   技術(shù)文章   >>   貼壁細胞怎么高效傳代?

            北京締一生物科技有限公司

            立即詢價

            您提交后,專屬客服將第一時間為您服務(wù)

            貼壁細胞怎么高效傳代?

            閱讀:756      發(fā)布時間:2023-1-30
            分享:

            貼壁生長的細胞,在培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)皿長至單層鋪滿的狀態(tài)后后,空間已基本上飽和,細胞生長、增殖受阻,為使其繼續(xù)擴增或生長,需要進行傳代(再培養(yǎng))處理。同時,傳代培養(yǎng)也可用于細胞種的保存。不僅如此,各種細胞實驗也是以高效的細胞傳代為基礎(chǔ)的。

            懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞則需經(jīng)消化等處理后才能分瓶。一般使用胰蛋白酶,將貼壁細胞消化成成單個細胞,也可加入EDTA提高消化能力(EDTA 是一種二價離子的螯合劑,能抑制細胞膜上的Ca2+和Mg2+)。常用的細胞消化液一般含有0.25%(w/v)的胰酶和0.03% (w/v) EDTA。

            實驗時,先用吸去細胞培養(yǎng)上清,用PBS清洗細胞,棄掉洗滌液,重新加入少量的胰酶-EDTA 消化液(根據(jù)培養(yǎng)皿的大小不同,一般2-5ml消化液即可,以剛好鋪滿整個皿底為原則),觀察細胞直到細胞變圓脫離瓶壁,此過程一般需要3-5分鐘,為了避免細胞成團,消化細胞的過程中不要拍打細胞瓶。對于特別難消化的細胞,可以加入胰酶EDTA 消化液后把細胞置于37°C 促進消化,細胞脫離瓶壁后,立刻加入含有血清的培養(yǎng)基中止消化。

            800-1000rpm,離心5分鐘,然后棄去中止用的培養(yǎng)基,加入適合的新的培養(yǎng)基輕輕混勻細胞,移入到新的培養(yǎng)瓶。傳代的比例視細胞類型而定。胰蛋白酶會對某些細胞的細胞膜產(chǎn)生損傷,對于這種類型的細胞,可用細胞刮輕輕刮下細胞,加入適量的培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻細胞,然后進行傳代培養(yǎng)。

            優(yōu)質(zhì)的胎牛血清可以提高細胞的活力,北京締一生物公司的Ausbian特級胎牛血清,幫您把血清問題全部考慮到,并做到血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復(fù)凍融。每個批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項目兩年不需換批次,細胞試驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定。


            會員登錄

            請輸入賬號

            請輸入密碼

            =

            請輸驗證碼

            收藏該商鋪

            標簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

            常用:

            提示

            您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
            在線留言