細胞培養(yǎng)物被支原體污染是經(jīng)常發(fā)生的。出于科學、安全和經(jīng)濟的原因，在基礎研究、診斷和生物技術生產(chǎn)中，必須從受污染的細胞培養(yǎng)物中消除支原體。在細胞培養(yǎng)物中消除、滅活或抑制支原體常用的方法是用抗生素治療。然而，一般來說，抗生素治療不能持久、成功地消除污染的支原體。此外，抗生素的細胞毒性可能對真核細胞造成不良的副作用，并可能促進耐藥支原體菌株的發(fā)展。Mynox®是第一種生物試劑，通過誘導微生物死亡來消除支原體污染。它已經(jīng)被證明是有效的，只有一個治療。Mynox®的活性基于其生物物理特性，這使得耐藥菌株的不易產(chǎn)生。
如何處理非薄膜病毒中污染的支原體？德國MB公司生產(chǎn)的Mynox細胞支原體清除，不僅能清除細胞中的支原體，對于非包膜病毒也有效。
冷凍或新鮮等量的細胞和無細胞碎片的病毒懸浮液可以處理。病毒滴度不影響治療的成功。
3.1細胞制備及消泡液
1.使用1.5 ml帶安全鎖的無菌反應管配制消毒液。
2.加入1 ml不加FCS的細胞培養(yǎng)基。
3.加入100µl Mynox®。
4. 將含有高達8% (v/v) FCS的125µl病毒原液轉(zhuǎn)移到混合物中。漩渦。包括病毒原液的處理混合物的總體積為1.225 ml。
注意:在旋轉(zhuǎn)過程中，請確保消除液濕潤離心機管的整個內(nèi)表面。
3.2 Mynox®的處理和去除
1.在室溫下將消去液孵育2小時。
2.將處理混合物在培養(yǎng)基中稀釋1:10，停止反應。這可以通過使用消除混合物感染亞融合宿主細胞培養(yǎng)物以同時繁殖無支原體病毒培養(yǎng)物來實現(xiàn)。最終體積應為消泡液體積的10倍。
注意:感染前檢測宿主細胞系是否受支原體污染。
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