假陰性PCR結(jié)果或非特異性放大，可能是由有缺陷的PCR循環(huán)器引起的?？刂坪眠@兩種現(xiàn)象都對能否實(shí)現(xiàn)良好實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐(GLP)十分重要。
檢查使用中的設(shè)備的正確溫度控制通常是一項(xiàng)艱巨的任務(wù)，PCR循環(huán)遵守質(zhì)量管理體系也并不容易實(shí)現(xiàn)。雖然商業(yè)上可用的溫度傳感器或驗(yàn)證/校準(zhǔn)服務(wù)通?？梢詼y量PCR循環(huán)模塊的溫度均勻性，但這種測量并不一定反映自行車準(zhǔn)確功能的所有關(guān)鍵參數(shù)。只有引用設(shè)置才能可靠地調(diào)查過程的所有相關(guān)參數(shù)。
qPCR Cycler Check™是一種熱PCR Cycler驗(yàn)證試劑盒，它提供了溫度敏感的PCR反應(yīng)，以驗(yàn)證溫度傳感器和Cycler處理器在現(xiàn)實(shí)運(yùn)行。引物序列與常規(guī)PCR方案結(jié)合設(shè)計(jì)，對溫度波動(dòng)和均勻性、溫度控制精度和時(shí)序非常敏感。
當(dāng)溫度偏離設(shè)定值超過2°C時(shí)，放大將發(fā)生改變，導(dǎo)致意想不到的Ct值和放大曲線的形態(tài)。循環(huán)性能測試與典型的PCR設(shè)置，以反映最常見的應(yīng)用。作為循環(huán)器精確溫度控制的附加指標(biāo)，包括預(yù)先調(diào)整的目標(biāo)濃度只能通過高效pcr擴(kuò)增。
qPCR定期校準(zhǔn)對于保證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性、減少實(shí)驗(yàn)誤差、符合實(shí)驗(yàn)室管理和認(rèn)證要求以及提升科研和臨床檢測的可靠性等方面都具有重要意義，科研數(shù)據(jù)可靠性：在科研領(lǐng)域，qPCR技術(shù)被廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原體檢測等領(lǐng)域。定期校準(zhǔn)可以確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性，為科研結(jié)論提供有力支持。因此，在使用qPCR儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書和實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)定進(jìn)行定期校準(zhǔn)。
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