培養(yǎng)細胞過程中發(fā)現(xiàn)細胞生長緩慢的情況先排查一下原因。
可能原因:由于更換不同培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必須成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;接種細胞起始濃度太低;細胞已老化;支原體污染。
解決方法:比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗,讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補加谷氨酰胺及生長因子;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;血清需保存在-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完;增加接種細胞起始濃度;換用新的保種細胞;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物或使用支原體清除試劑。