狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

            | 注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

            15000105423

            technology

            首頁   >>   技術(shù)文章   >>   如何將自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象運(yùn)用到報(bào)告基因中?

            愛必信(上海)生物科技有...

            立即詢價(jià)

            您提交后,專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)

            如何將自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象運(yùn)用到報(bào)告基因中?

            閱讀:925      發(fā)布時(shí)間:2022-12-17
            分享:


            對(duì)于自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象,大家應(yīng)該都是比較熟悉的,其廣泛存在于海洋生物、微生物和陸生生物中。生物發(fā)光現(xiàn)象其實(shí)是在生物體內(nèi)由于生命過程中由化學(xué)反應(yīng)介導(dǎo)的將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能所產(chǎn)生的,這其中起到主要作用的是一種叫熒光素酶的物質(zhì)。熒光素酶是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,具有代表性的是螢火蟲熒光素酶海腎熒光素酶,被廣泛應(yīng)用到生物學(xué)的報(bào)告基因中——一類可以編碼熒光蛋白或酶,從而將看不見的底物轉(zhuǎn)化為發(fā)光或彩色產(chǎn)物的一類基因報(bào)告系統(tǒng),光信號(hào)可通過發(fā)光檢測(cè)儀或CCD相機(jī)進(jìn)行檢測(cè),是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域基礎(chǔ)研究的一個(gè)重要工具,廣泛應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因表達(dá)。

            原理解析


            螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶雖然同屬于熒光素酶,但是它們的來源及發(fā)光原理、發(fā)光顏色、檢測(cè)波長(zhǎng)等都不盡相同。

            表1 兩種熒光素酶作用原理的區(qū)別

            -

            螢火蟲熒光素酶

            海腎熒光素酶

            來源

            從螢火蟲中分離得到

            從海腎中分離得到

            分子量

            61 kDa

            36 kDa

            底物和輔因子

            熒光素、氧氣、ATP和鎂離子

            腔腸素和氧氣

            發(fā)光顏色

            黃綠色

            藍(lán)色

            檢測(cè)波長(zhǎng)

            550-570nm

            480nm


            螢火蟲熒光素酶發(fā)光原理:



            海腎熒光素酶發(fā)光原理:



            利用熒光素酶與底物結(jié)合發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的特性,可以把感興趣的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件克隆在熒光素酶基因的上/下游,構(gòu)建成熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,經(jīng)適當(dāng)刺激或處理后裂解細(xì)胞,測(cè)定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷刺激前后或不同刺激對(duì)感興趣的調(diào)控元件的影響。



            圖2 熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)流程圖

            由于螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶的底物和發(fā)光顏色不同,并且易于定量,檢測(cè)靈敏度高,所以在雙報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)中得到廣泛應(yīng)用。在雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)中螢火蟲熒光素酶一般是作為主報(bào)告基因, 海腎熒光素酶通常作為內(nèi)參報(bào)告基因,來標(biāo)定檢測(cè)用報(bào)告基因的測(cè)量結(jié)果,從而達(dá)到有效地減少實(shí)驗(yàn)誤差的目的。

            新品上市

            貨號(hào)

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            abs60341

            雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

            Firefly & Renilla Assay Kit

            100T/1000T


            愛必信雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒為檢測(cè)基因的表達(dá)量提供有效的手段,在 DLR檢測(cè)中,螢火蟲螢光素酶(Firefly luciferase)和海腎螢光素酶(Renilla luciferase)的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測(cè)。先以螢光素(Luciferin)為底物來檢測(cè)螢火蟲螢光素酶的活性,然后加入抑制螢火蟲螢光素酶催化的物質(zhì),同時(shí)加入腔腸素(Coelenterazine)檢測(cè)海腎螢光素酶的活性,實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)。

            產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

            ? 兼容性好:本試劑盒的光信號(hào)可以兼容化學(xué)發(fā)光儀、酶標(biāo)儀或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。
            ? 準(zhǔn)確性高:系統(tǒng)包含海腎熒光素,可校正孔間細(xì)胞數(shù)量、轉(zhuǎn)染效率、以及細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)造成的誤差,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
            ? 抗干擾性強(qiáng):無細(xì)胞內(nèi)源活性干擾。

            除以上介紹的雙熒光素酶報(bào)告試劑盒外我們提供多種熒光素酶檢測(cè)試劑盒、轉(zhuǎn)染試劑盒,以滿足不同用戶的使用需求。具體信息如下:

            貨號(hào)

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            abs60342

            螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

            50T/200T/1000T

            abs60343

            海腎螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

            50T/200T/1000T

            abs60344

            一步法螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

            50T/200T/1000T

            abs60252

            小核酸轉(zhuǎn)染試劑

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60253

            PM原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60254

            SP懸浮細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60255

            質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒(貼壁細(xì)胞)

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60256

            PM原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60257

            溶液A(轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑,僅用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染)

            0.25ml/0.5ml/1ml

            abs60258

            Elite Fect-I小核酸活體組織轉(zhuǎn)染試劑(小鼠轉(zhuǎn)染)

            3只/6只

            abs60259

            核酸轉(zhuǎn)染試劑盒

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60317

            核酸共轉(zhuǎn)染試劑

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60322

            Lipofect5000 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑

            0.5ml/1.0ml

            abs60324

            PM原代細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑盒

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60325

            SP懸浮細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑盒

            0.5ml/1.0ml/1.5ml

            abs60327

            SP懸浮細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒

            0.5ml/1.0ml/1.5ml


             


            會(huì)員登錄

            請(qǐng)輸入賬號(hào)

            請(qǐng)輸入密碼

            =

            請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

            收藏該商鋪

            標(biāo)簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

            常用:

            提示

            您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
            在線留言