人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SH-SY5Y） 是于1970年建自骨瘤轉(zhuǎn)移灶的神經(jīng)母細(xì)胞瘤 SK-N-SH細(xì)胞系經(jīng)3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細(xì)胞的密度可高達(dá)106 cells/cm2，具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性?；拘螒B(tài)上皮樣，多數(shù)貼壁，少數(shù)懸??； 營養(yǎng)體系：推薦DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S（abs9244）。
表1 SH-SY5Y細(xì)胞基本信息
SH-SY5Y（人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞） | |
形態(tài) | 上皮樣 |
生長特性 | 多數(shù)貼壁，少數(shù)懸浮 |
營養(yǎng)體系 | DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S（abs9244） |
圖1 SH-SY5Y（人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）
首先，我們討論的是SY5Y五天傳一代算不算正常？SH-SY5Y 增殖緩慢，再加上喜歡聚團(tuán)生長，鏡下觀察融合率不高，但細(xì)胞簇實(shí)際密度大，需要5-7天才能達(dá)到80%以上的融合率，所以5-7天傳一代很正常（如圖2所示，融合率約為70%的SY5Y）。如果細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)到一周都無法傳代，建議把細(xì)胞消化下來，接種到更小的孔板中，增加細(xì)胞密度，促進(jìn)細(xì)胞生長。
接下來我們討論第二個(gè)話題SY5Y懸浮細(xì)胞過多正不正常？SY5Y的生長特點(diǎn)為大部分貼壁，呈上皮樣，有短觸角延伸出來，傾向于成簇生長，容易成團(tuán)；少部分懸浮，圓潤有光澤。 如果SY5Y出現(xiàn)大量懸浮是不正?，F(xiàn)象。如圖3所示，懸浮細(xì)胞居多的SY5Y。
圖2 懸浮細(xì)胞居多的SY5Y
如何解決這種情況呢？如果貼壁細(xì)胞生長狀態(tài)良好、密度適中，可以舍棄懸浮細(xì)胞；如果貼壁細(xì)胞很少，用胰酶消化并離心，將細(xì)胞用新鮮的完培重懸并接種到培養(yǎng)瓶，隔段時(shí)間觀察細(xì)胞是否貼壁。
最后我們討論一下不同營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y形態(tài)差異大不大。我們對比了兩種營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y細(xì)胞形態(tài)。體系一是DMEM+20%FBS-熱滅活，體系2是DMEM-F12 + 10%FBS（如圖4所示）。在培養(yǎng)的第2天和第5天進(jìn)行了相應(yīng)的形態(tài)比較。傳代第2天，低密度下，兩種營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y形態(tài)沒有明顯區(qū)別，均為少數(shù)懸浮，多數(shù)呈上皮樣，有短觸角延伸出來，傾向于聚團(tuán)生長；傳代第5天，體系2培養(yǎng)的SY5Y團(tuán)塊話過于嚴(yán)重，細(xì)胞黏在一起，細(xì)胞輪廓難以分辨清楚，體系1細(xì)胞有略微聚團(tuán)（SY5Y本身有聚團(tuán)生長特性），細(xì)胞形態(tài)正常。體系1更適合細(xì)胞增殖。
圖3 兩種營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y形態(tài)對比圖（兩種營養(yǎng)體系所用血清批號一致）
本期講解就到這里了，下一期您想了解哪種細(xì)胞的培養(yǎng)攻略呢？歡迎留言評論哦。如有細(xì)胞培養(yǎng)問題，歡迎掃碼加我微信哦。
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貨號 | 品名 | 規(guī)格 |
abs977 | 胎牛血清（特級） | 500ml |
abs972 | 胎牛血清（優(yōu)級） | 500ml |
abs974 | 胎牛血清（標(biāo)準(zhǔn)級） | 500ml |
abs9483 | 高糖DMEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9484 | RPMI-1640培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9505 | MEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9506 | α-MEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9554 | Ham's F-12 | 500ml |
abs9561 | DMEM/F-12培養(yǎng)基 | 500ml |
abs962 | PBS緩沖液 | 500ml |
abs970 | D-PBS緩沖液（1×，無鈣鎂） | 500ml |
abs971 | D-PBS緩沖液（含 Ca2+ Mg2+） | 500ml |
abs9257 | Hanks平衡鹽溶液（不含Ca2+ Mg2+,無酚紅） | 500ml |
abs9258 | Hanks平衡鹽溶液（含Ca2+ Mg2+,無酚紅） | 500ml |
abs47014938 | 胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%），含酚紅 | 100ml |
abs47047375 | 胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%），不含酚紅 | 100mL |
abs9479 | 無DMSO無血清細(xì)胞凍存液 | 100mL |
abs9417 | 無血清細(xì)胞凍存液 | 100mL |
abs9473 | 細(xì)胞凍存液（含血清） | 100mL |
abs9474 | 組織保存液 | 100ml |
abs9480 | 組織凍存試劑盒 | 30ml |
abs9486 | 模具 | 1個(gè)/套 |
abs9487 | 小刀 | 5片/包 |
abs9481 | 組織復(fù)蘇試劑盒 | 50ml |
abs42020125 | 卡那霉素B硫酸鹽 | 250mg |
abs42018967 | 硫酸慶大霉素溶液 | 10ml |
abs9244 | 青鏈雙抗 | 100ml |
abs9245 | 青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液 | 100ml |
abs44071148 | 制霉菌素 | 1g |
abs9252 | 支原體檢測試劑盒 | 100T |
abs9375 | 支原體清除試劑 | 200uL×5 |
abs9376 | 支原體預(yù)防 | 500uL×4 |
abs816578 | 環(huán)丙沙星鹽酸鹽 | 500mg |
abs9374 | 水盤抑菌劑 | 20ml |
abs9371 | 水浴鍋抑菌劑 | 100ml |
abs9372 | 培養(yǎng)箱除菌劑 | 480ml |
abs9373 | 細(xì)胞房除菌劑 | 480ml |
Absin特色產(chǎn)品線：
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