黑膠蟲(chóng)污染是一個(gè)老生常談的話(huà)題。目前，科研界對(duì)黑膠蟲(chóng)的污染特征沒(méi)有統(tǒng)一的判定標(biāo)準(zhǔn)，通常污染特征總結(jié)有：
1）活躍游動(dòng)或旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)或原地顫動(dòng)（如視頻1、2、3所示）；
視頻1 活躍游動(dòng)
視頻2 旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)
視頻3 原地顫動(dòng)
2）呈桿狀、球狀、卵圓狀；
3）培養(yǎng)基不渾濁；
4）復(fù)蘇或傳代時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)黑膠蟲(chóng)污染，并且與細(xì)胞呈現(xiàn)此消彼長(zhǎng)的現(xiàn)象。
我們對(duì)多個(gè)黑膠蟲(chóng)樣本進(jìn)行測(cè)序鑒定，這里舉兩個(gè)典型鑒定結(jié)果給大家分享：
圖1 Sphingomonas（鞘氨醇單胞菌）單個(gè)及菌落圖
屬名 | 樣本2，15，21，27鑒定為Sphingomonas sp.（鞘氨醇單胞菌屬） |
能否游動(dòng) | 以單側(cè)生極性鞭毛運(yùn)動(dòng) |
類(lèi)別 | G-菌 |
形狀 | 桿狀；菌落為黃色 |
大小 | 0.3-0.8 * 1.0-2.7µm |
特點(diǎn) | 該菌屬至今共有12個(gè)種，是一類(lèi)豐富的新型微生物資源，可用于芳香化合物的生物降解，在環(huán)境保護(hù)及工業(yè)生產(chǎn)方面具有巨大的應(yīng)用潛力 |
分布范圍 | 河水、根際、地表及深層的地下的沉積物、海洋，連極地土壤中都有它們的蹤跡 |
圖2 Brevundimonas vesicularis（泡囊假單胞菌）單個(gè)及菌落圖
屬名 | 樣本4，19鑒定為Brevundimonas vesicularis（泡囊假單胞菌）屬于Brevundimonas sp.（短波單胞菌屬） |
類(lèi)別 | G-菌 |
形狀 | 桿狀；菌落為圓形，凸起，表面濕潤(rùn)光滑，邊緣整齊 |
大小 | 0.4-0.5X 1-2μm |
代表種 | 泡囊短波單胞菌是一種較罕見(jiàn)的非發(fā)酵性病原性假單胞菌，在人體可引起肺炎、敗血癥、皮膚炎癥和壞死性蜂窩織炎等 |
分布范圍 | 通常存在于土壤、河流等自然界中 |
這些黑膠蟲(chóng)樣本被鑒定為細(xì)菌。另外我們也查閱了大批文獻(xiàn)，十幾年前就有人做了相關(guān)研究，很多都鑒定為細(xì)菌，例如以下這篇[1]：
圖3 客戶(hù)文獻(xiàn)截圖
這篇文章講述的是，首先從黑膠蟲(chóng)污染細(xì)胞樣本中分離得到黑膠蟲(chóng)，然后從黑膠蟲(chóng)中提取基因組DNA進(jìn)行基因測(cè)序及分析，鑒定出的黑膠蟲(chóng)為無(wú)色桿菌屬(Achromobacter)。
細(xì)菌已經(jīng)在地球上存在三十多萬(wàn)年了，具有不同的形狀，根據(jù)形狀主要分為三類(lèi)，即：球菌、桿菌和螺旋菌（包括弧菌、螺菌、螺桿菌）（圖4）。鞭毛是著生在細(xì)菌表面的絲狀運(yùn)動(dòng)器官。由于鞭毛很細(xì)，只有用特殊的染色法，才能用光學(xué)顯微鏡觀察到。直徑12～25nm，長(zhǎng)3～12μm，柔軟、波形（圖5）。
圖4 細(xì)菌模式圖和細(xì)菌形狀分類(lèi)
 圖5 細(xì)菌鞭毛分布圖 | 單生（一根鞭毛著生于一端） 雙生（兩根鞭毛分別著生于兩端） 單叢生（一叢鞭毛著生于一端） 雙叢生（兩叢鞭毛分別著生于兩端） 周生（多根鞭毛遍布于菌體上） |
鞭毛有三種運(yùn)動(dòng)方式：在液體中泳動(dòng)，在固體表面上滑行，在液體中旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)。所以難怪，我們看到的黑膠蟲(chóng)不是在液體中活躍游動(dòng)，就是在液體中旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)，這就和黑膠蟲(chóng)被鑒定為細(xì)菌的結(jié)果相吻合了。
黑膠蟲(chóng)污染頑固，如何消殺，胞胞巴適有秘方——黑膠蟲(chóng)清除劑，其所含有的多肽活性成分，相比傳統(tǒng)抗生素有效清除黑膠蟲(chóng)；清除周期短，視黑膠蟲(chóng)污染程度通常3-6天可有效去除；廣譜性強(qiáng)，可有效清除常見(jiàn)支原體污染。
本期講解就到這了，請(qǐng)持續(xù)關(guān)注愛(ài)必信公眾號(hào)，等待探秘黑膠蟲(chóng)（下）。
[1] Jennifer Sue Gray, Janette Marie Birmingham, Jenifer Imig Fenton. Got black swimming dots in your cell culture? Identification of Achromobacter as a novel cell culture contaminant[J]. Biologicals, 2010, 38(2):273-7.
注：圖源網(wǎng)絡(luò)和客戶(hù)，僅供參考學(xué)習(xí)用。
表1 細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)產(chǎn)品推薦
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 |
abs981 | 胎牛血清（特級(jí)） | 500ml |
abs972 | 胎牛血清（優(yōu)級(jí)） | 500ml |
abs974 | 胎牛血清（標(biāo)準(zhǔn)級(jí)） | 500ml |
abs9483 | 高糖DMEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9484 | RPMI-1640培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9505 | MEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9506 | α-MEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9554 | Ham's F-12培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9563 | Ham's F-12K培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9561 | DMEM/F-12培養(yǎng)基 | 500ml |
abs962 | PBS緩沖液 | 500ml |
abs970 | D-PBS緩沖液（不含 Ca2+ Mg2+） | 500ml |
abs971 | D-PBS緩沖液（含 Ca2+ Mg2+) | 500ml |
abs9257 | Hanks平衡鹽溶液（不含 Ca2+ Mg2+) | 500ml |
abs9258 | Hanks平衡鹽溶液（含 Ca2+ Mg2+) | 500ml |
abs47014938 | 胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%），含酚紅 | 100ml |
abs47047375 | 胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%），不含酚紅 | 100mL |
abs9479 | 無(wú)DMSO無(wú)血清細(xì)胞凍存液 | 100mL |
abs9417 | 無(wú)血清細(xì)胞凍存液 | 100mL |
abs9473 | 細(xì)胞凍存液（含血清） | 100mL |
abs9474 | 組織保存液 | 100ml |
abs9480 | 組織凍存試劑盒 | 30ml |
abs9486 | 模具 | 1個(gè)/套 |
abs9487 | 小刀 | 5片/包 |
abs9481 | 組織復(fù)蘇試劑盒 | 50ml |
abs9648 | 黑膠蟲(chóng)清除劑 | 200ul |
abs42020125 | 卡那霉素B硫酸鹽 | 250mg |
abs42018967 | 硫酸慶大霉素溶液 | 10ml |
abs9244 | 青鏈雙抗 | 100ml |
abs9245 | 青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液 | 100ml |
abs42013298 | 兩性霉素B | 1g |
abs44071148 | 制霉菌素 | 1g |
abs9246 | 青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液 | 100ml |
abs9252 | 支原體檢測(cè)試劑盒 | 100T |
abs9375 | 支原體清除試劑 | 200uL×5 |
abs9376 | 支原體預(yù)防 | 500uL×4 |
abs816578 | 環(huán)丙沙星鹽酸鹽 | 500mg |
abs9374 | 水盤(pán)抑菌劑 | 20ml |
abs9371 | 水浴鍋抑菌劑 | 100ml |
abs9372 | 培養(yǎng)箱除菌劑 | 480ml |
abs9373 | 細(xì)胞房除菌劑 | 480ml |
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