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            生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學(xué)研究應(yīng)用分享

            閱讀:750      發(fā)布時間:2024-5-23
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            一、背景介紹


            1、腎功能檢測指標(biāo)及臨床意義


            肌酐 abs580199-96T

            臨床意義:血清肌酐濃度升高見于急慢性腎小球腎炎、急性或慢性腎功能不全等。血清肌酐濃度與肌肉量成比例,故肢端肥大癥巨人癥時,血清肌酊酐濃度升高;相反,肌肉萎suo性疾病時血清肌酐濃度可降低。透析治療前后血清肌酐測定可用于選擇透析指標(biāo),判斷透析治療效果。


            尿素氮(BUN) abs580197-96T

            臨床意義:尿素氮是機體蛋白質(zhì)的代謝終末產(chǎn)物,是一項檢測腎小球的濾過功能的指標(biāo),一般在腎功能不全的失代償期時或氮質(zhì)血癥時,血尿素氮會明顯升高。進行該項指標(biāo)的測定,主要用于診斷器質(zhì)性腎功能損害,例如各種原發(fā)性和繼發(fā)性腎小球腎炎、多囊腎、腎腫瘤等,還可以作為腎衰竭時透析的評估指標(biāo)。


            尿酸 abs580057-96T

            臨床意義:尿酸是嘌呤代謝的終末產(chǎn)物,人類大部分來自鳥嘌呤,主要是經(jīng)腎小球濾過隨尿排出,腎功能減退時血清尿酸增高。尿酸可由腎小球濾過和腎小管排泌,但大部分被腎小管重吸收,最后僅排出濾過量的8%。尿酸增高:嚴(yán)重腎衰竭時可有部分尿酸從腎小管排泌,慢性尿毒癥時血清尿酸的增高程度不明顯。各種原因所致尿酸生成異常增多,如原發(fā)性或繼發(fā)性痛風(fēng)者,血清尿酸可顯著增高。尿酸降低常見于惡性貧血、乳糜瀉及腎上腺皮質(zhì)激素等藥物治療后。


            2、肝功能檢測指標(biāo)及臨床意義


            谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT) abs580002-96T

            臨床意義:人體中很多臟器都含有ALT,其分布大致為肝>腎>心>肌肉。肝內(nèi)ALT活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其它臟器的活性,主要存在于肝細(xì)胞質(zhì)的可溶性部分,故測定ALT反映肝臟損害具有特殊意義。血清ALT活性增高原因:急性病毒性肝炎;骨骼肌、腎臟及胰腺等組織壞死;伴有急性肝炎的傳染性單核細(xì)胞增多癥;嚴(yán)重心肌梗塞、心力衰竭時的肝郁血;膽道疾病、肝外癌性膽道梗阻性黃疸(如膽管癌、胰頭癌)、膽石癥、膽管炎及膽囊炎;應(yīng)用銻劑、奎林、呋喃西林、利福平、某些避孕藥、苯巴妥等藥物,以及酒精、鉛、汞、四氯化碳等中毒;外科手術(shù)、麻醉、劇烈運動、早期妊娠等。


            谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) abs580004-96T

            臨床意義:臨床AST測定主要用于診斷急性心肌梗塞(AMI)、肝細(xì)胞及骨骼肌疾病。AMI發(fā)作后6-8h開始升高,24h達(dá)高峰,約3-5天恢復(fù)正常。升高還見于肺栓塞,充血性心力衰竭,病毒性肝炎,中毒性肝炎,肝硬化,肝癌(早期正常),膽道阻塞,溶血性疾病、骨骼肌疾病如進行性肌營養(yǎng)不良、皮肌炎(神經(jīng)性肌炎正常)、擠壓性肌肉損傷,壞疽,急性胰腺炎等。肝炎發(fā)病早期,由于肝AST含量高,往往血清AST/ALT>1,但由于ALT清除較慢,所以不久ALT>AST。恢復(fù)期一般也是ALT恢復(fù)較慢。ALT和AST持續(xù)升高,往往是慢性肝炎的指標(biāo)。


            不同類型的肝炎患者AST/ALT比值


            肝臟疾病

            血液AST來源形式

            AST/ALT比值

            急性肝炎和輕度慢性肝炎

            肝細(xì)胞線粒體完整,AST主要從肝細(xì)胞胞漿內(nèi)釋放

            <1

            重癥肝炎、中度和重度慢性肝炎

            肝細(xì)胞線粒體遭到嚴(yán)重破壞,AST從線粒體和胞漿內(nèi)釋放

            ≈1

            肝硬化和肝癌患者

            肝細(xì)胞的破壞程度更加嚴(yán)重,線粒體也受到嚴(yán)重的破壞

            >1,甚至>2





            膽紅素  abs580147-96T

            臨床意義:總膽紅素是直接膽紅素和間接膽紅素的總和。血清總膽紅素的測定是肝、膽功能檢查中的一項重要檢測項目血清直接膽紅素的升高,說明經(jīng)肝細(xì)胞處理后膽紅素從膽道的排泄發(fā)生障礙。直接膽紅素的測定有助于黃疸類型的診斷和鑒別診斷。直接膽紅素增高:主要見于阻塞性黃疸、肝細(xì)胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等。間接膽紅素主要是由紅細(xì)胞破壞而來,未在肝內(nèi)經(jīng)過葡萄糖醛酸化。間接膽紅素經(jīng)過肝臟代謝又可變?yōu)橹苯幽懠t素,隨膽汁排入膽道,最后經(jīng)大便排出。一般情況下間接膽紅素偏高往往預(yù)示著肝臟的病變。


            白蛋白  abs580137-96T & abs580138-96T

            臨床意義:白蛋白升高偶見于脫水所致的血液濃縮。白蛋白降低與總蛋白原因大致相同。急性降低見于大量出血與嚴(yán)重?zé)齻?。慢性降低見于腎病蛋白尿、肝功能受損、腹水形成、腸道腫瘤與結(jié)核慢性失血、營養(yǎng)不良和消耗性疾病等。白蛋白如低于20g/L,臨床可出現(xiàn)水腫。


            3、血糖檢測指標(biāo)及臨床意義


            葡萄糖 abs580025-96T

            臨床意義:空腹血糖升高/降低分為生理性增高和病理性增高。生理性血糖升高:多見于飽食或高糖飲食及劇烈運動后或情緒緊張等。

            病理性升高:

            a.糖尿??;

            b.其它內(nèi)分泌疾病如甲亢、巨人癥或肢端肥大癥、腎上腺皮質(zhì)功能亢進、嗜鉻細(xì)胞瘤等;

            c.肝硬化病人。生理性低血糖多見于饑餓和劇烈運動。

            病理性低血糖:

            a.對抗胰島素的激素分泌不足,如垂體前葉功能減退、腎上腺皮質(zhì)功能減退和甲狀腺功能減退而使生長素、腎上腺皮質(zhì)激素分泌減少;

            b.嚴(yán)重肝病患者,由于肝臟儲存糖原及糖異生等功能低下,肝臟不能有效地調(diào)節(jié)血糖。


            4、血脂檢測指標(biāo)及臨床意義


            甘油三酯(TG) abs580085-96T

            臨床意義:現(xiàn)在認(rèn)為甘油三酯也是冠心病發(fā)病的一個危險因素,當(dāng)其升高時,也應(yīng)該給予飲食控制或藥物治療。其升高可見于各種高脂蛋白血癥、糖尿病、痛風(fēng)、梗阻、黃疸、甲狀腺功能低下、胰腺炎等。降低:見于低脂蛋白血癥、營養(yǎng)吸收不良、甲狀腺功能亢進、甲狀旁腺功能亢進,還可見于過度饑餓、運動等。


            總膽固醇(TC)  abs580114-96T

            臨床意義:膽固醇升高容易引起動脈粥樣硬化性心、腦血管疾病如冠心病、心肌梗死,腦卒中等。但如果作為一個診斷指標(biāo)來說,它既不夠特異,也不夠敏感,所以不能作為診斷指標(biāo),只能作為評價動脈粥樣硬化的危險因素,而常用做動脈粥樣硬化的預(yù)防、發(fā)病估計、治療觀察等的參考指標(biāo)。膽固醇升高:可見于各種高脂蛋白血癥、梗阻性黃疸、腎病綜合征、甲狀腺功能低下、慢性腎功能衰竭、糖尿病等時。此外,吸煙、飲酒、緊張、血液濃縮等也都可使血液膽固醇升高。妊娠末三個月時,可能明顯升高,產(chǎn)后恢復(fù)原有水平。膽固醇降低:可見于各種脂蛋白缺陷狀態(tài)、肝硬化、惡性腫瘤、營養(yǎng)吸收不良、巨細(xì)胞性貧血等。此外,女性月經(jīng)期也可降低。


            低密度脂蛋白 abs580113-96T

            臨床意義:低密度脂蛋白(LDL)升高可見于家族性高膽固醇血癥、家族性apoB缺陷癥、混合性高脂血癥、糖尿病、甲狀腺機能低下、腎病綜合征、梗阻性黃疸、慢性腎功能衰竭、妊娠、多發(fā)性肌瘤、某些藥物的使用等。遺傳性高脂蛋白血癥、甲狀腺功能低下、腎病綜合征、梗阻性黃疸、慢性腎功能衰竭、Cushing綜合征等。LDL升高是發(fā)生動脈粥樣硬化的重要危險因素之一,用于判斷是否存在患冠心病的危險性,也是血脂異常防治的首要指標(biāo)。低密度脂蛋白降低:可見于家族性無β和低β-脂蛋白血癥、營養(yǎng)不良、甲狀腺機能亢進、消化吸收不良、肝硬化、慢性消耗疾病、惡性腫瘤、apoB合成減少等。


            高密度脂蛋白 abs580112-96T

            臨床意義:高密度脂蛋白(HDL)主要功能是將膽固醇從周圍組織細(xì)胞轉(zhuǎn)運到肝臟,代謝及排泄過多的膽固醇,以維持血漿正常膽固醇水平。其被譽為抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子。所以HDL水平低的個體患冠心病的危險性增加,其水平高者患冠心病的可能性小。降低:見于急、慢性肝病、急性應(yīng)激反應(yīng)(心肌梗塞、外科手術(shù)、損傷)、糖尿病、甲狀腺功能亢進或減低、慢性貧血等。

            注:來源搜狐,侵刪!


            二、常規(guī)腎、肝功能檢測在科學(xué)研究中的應(yīng)用案例


            2023年6月17日,上海市第一婦嬰保健院生殖免疫科周倩主任醫(yī)生、中國科學(xué)院重慶綠色智能技術(shù)研究院于永生副研究員聯(lián)合重慶大學(xué)生物工程學(xué)院生物流變學(xué)教育部重點實驗室馮茜副教授團隊,在Acta Biomaterialia雜志上發(fā)表了題為“Functionalized human umbilical cord mesenchymal stem cells andinjectable HA/Gel hydrogel synergy in endometrial repair and fertility recovery"的研究論文。他們的研究表明,負(fù)載 hUCMSCs 的可注射水凝膠具有作為促進子宮內(nèi)膜損傷快速恢復(fù)的有效治療策略的潛力,并且這種水凝膠是再生醫(yī)學(xué)應(yīng)用的有前途的生物材料。


            生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學(xué)研究應(yīng)用分享

            圖1 功能化人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與可注射HA/Gel水凝膠在子宮內(nèi)膜修復(fù)和生育能力恢復(fù)中的協(xié)同作用概述


            研究亮點:

            a.氧化透明質(zhì)酸(HA-CHO)/酰肼接枝明膠(Gel-ADH)水凝膠聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUCMSCs)可有效改善子宮內(nèi)膜損傷大鼠模型的子宮內(nèi)膜再生;

            b.hUCMSCs負(fù)載水凝膠治療通過MEK/ERK1/2信號通路促進子宮內(nèi)膜VEGF的表達(dá),調(diào)節(jié)炎癥因子的平衡;

            c.子宮內(nèi)膜損傷大鼠模型胚胎著床率和活產(chǎn)率均恢復(fù)至正常水平,且水凝膠治療后對母鼠、胎兒及子代發(fā)育無不良影響。


            生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學(xué)研究應(yīng)用分享

            圖2  母鼠血清肌酐(abs580199-96T)、尿素氮、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶含量檢測評估腎和肝功能損傷情況


            接下來,小愛就以腎功能檢查指標(biāo)肌酐檢測試劑盒為例,給大家詳細(xì)介紹使用方法。


            肌酐檢測試劑盒使用方法介紹


            一、試劑盒組分


            組分

            規(guī)格

            儲存條件

            96-Well Microplate

            1 plate

            Reaction Buffer

            20mL×1

            4℃

            Enzyme

            Powder×1

            -20℃,避光保存

            Dye Reagent

            Powder×1

            -20℃,避光保存

            Standard

            Powder×1

            4℃

            Plate Adhesive Strips

            3 Strips

            Technical Manual

            1 Manual





            二、操作步驟:


            1、材料和試劑準(zhǔn)備

            自備材料:酶標(biāo)儀(可在546nm處讀取吸光值)、蒸餾水、移液器與槍頭、研缽、離心機、計時器等。

            Enzyme:使用前加入9 mL Reaction Buffer 充分溶解。

            Dye Reagent:使用前加入10 mL Reaction Buffer充分溶解。

            Standard:使用前加入1mL蒸餾水溶解,然后取50 μL加入到950 μL蒸餾水中,獲得濃度為5 mmol/L的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。


            2、樣本處理

            尿液、血清或血漿樣本:直接檢測。


            3、上樣及檢測

            使用前將所有試劑加熱至室溫,然后按照如下表格加樣。



            試劑

            標(biāo)準(zhǔn)品孔

            對照孔

            樣品孔

            Standard

            10μL

            -

            -

            Distilled water

            -

            10μL

            -

            Sample

            -

            -

            10μL

            Enzyme

            90μL

            90μL

            90μL

            Dye Reagent

            100μL

            100μL

            100μL

            混合均勻,放入37℃恒溫箱中孵育15min后,在546nm處測定吸光值。





            注:a.對于標(biāo)準(zhǔn)品,可進行2倍連續(xù)稀釋,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線;

                  b.對于未知的樣品,我們建議挑選幾個樣品進行預(yù)實驗,以確定樣品濃度和稀釋倍數(shù)。


            4、標(biāo)準(zhǔn)曲線

            標(biāo)準(zhǔn)曲線僅用于參考,每次實驗都必須做一條新的標(biāo)準(zhǔn)曲線。


            生化檢測│腎功能、肝功能、血糖、血脂檢測臨床意義及科學(xué)研究應(yīng)用分享

            檢測范圍:0.05mmol/L-5mmol/L

            溫馨提示:本公司提供的試劑盒僅作科學(xué)研究使用,不支持臨床檢測。

            常見問題解答


            Q1:試劑盒中的96-Well Microplate只有一個,不夠?qū)嶒炇褂迷趺崔k?

            A1:該試劑盒中的96孔板是免費送的,后續(xù)實驗可以用常規(guī)的96孔酶標(biāo)板代替。


            Q2:試劑盒操作說明書中既有標(biāo)準(zhǔn)曲線法又有公式法,我應(yīng)該選擇哪種計算方式?

            A2:兩種方式任選一種就可以,公式是簡便算法,建議按照標(biāo)曲計算,會更加準(zhǔn)確。需要注意的是,使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法,每次實驗必須重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。


            Q3:試劑盒一次用不完,最長能保存多久?

            A3:試劑盒中染料(Dye)溶解后易氧化變質(zhì),需要現(xiàn)配現(xiàn)用,不建議儲存。長期儲存可能影響顯色讀數(shù)進而影響檢測;如果樣本需要分批檢測,建議分批收樣儲存,待樣本收齊后統(tǒng)一檢測。此外,如因儲存時間過久或其他人為原因?qū)е陆M分不夠使用,可與我司聯(lián)系單獨購買試劑盒組分。



            參考文獻(xiàn)


            [1] 楊柳易,王琛.有氧糖酵解對腎臟疾病影響的研究進展[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志, 2022,23(8):744-746.

            [2] Chang L, Li G, Jiang S, et al. 1-Pyrroline-5-carboxylate inhibit T cell glycolysis in prostate cancer microenvironment by SHP1/PKM2/LDHB axis[J]. Cell Commun Signal. 2024;22(1):101. Published 2024 Feb 8. doi:10.1186/s12964-024-01493-1

            常規(guī)生化功能檢查試劑盒推薦:


            檢測項目

            貨號

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            檢測范圍

            肝功能

            abs580002

            谷丙轉(zhuǎn)氨酶 (ALT)檢測試劑盒

            96T

            0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

            abs580004

            谷草轉(zhuǎn)氨酶 (AST)檢測試劑盒

            96T

            0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

            abs580137

            白蛋白(BCG)檢測試劑盒

            96T

            1 mg/mL - 100 mg/mL

            abs580138

            白蛋白(BCP)檢測試劑盒

            96T

            0.5 mg/mL - 50 mg/mL

            abs580147

            膽紅素檢測試劑盒

            96T

            1 μmol/L - 200 μmol/L

            腎功能

            abs580057

            尿酸檢測試劑盒

            96T

            0.04 mmol/L - 4 mmol/L

            abs580197

            尿素氮(BUN)檢測試劑盒

            96T

            0.05 mmol/L - 1 mmol/L

            abs580199

            肌酐檢測試劑盒

            96T

            0.02 mmol/L - 2 mmol/L

            血糖

            abs580025

            葡萄糖檢測試劑盒

            96T

            0.1 mmol/L - 10 mmol/L

            血脂

            abs580085

            甘油三酯(TG)檢測試劑盒

            96T

            4 μmol/L - 400 μmol/L

            abs580114

            總膽固醇(TC)檢測試劑盒

            96T

            0.05 mmol/L - 5 mmol/L

            abs580113

            低密度脂蛋白檢測試劑盒

            96T

            0.1 mmol/L - 10 mmol/L

            abs580112

            高密度脂蛋白檢測試劑盒

            96T

            0.1 mmol/L - 10 mmol/L






            Absin產(chǎn)品線:
            爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...
            特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...



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