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            美谷分子儀器(上海)有限公司

            藥物開發(fā) ∣ 斑馬魚等模式生物的高通量篩選方法介紹—Molecular Devices

            時(shí)間:2018-8-31 閱讀:915
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            斑馬魚等模式生物的高通量篩選方法介紹
                   
            自從20世紀(jì)70年代美國俄勒岡大學(xué)的George Streisinger教授利用斑馬魚進(jìn)行遺傳學(xué)及發(fā)育生物學(xué)方面的研究以來,斑馬魚已越來越多地被應(yīng)用于人類疾病的研究中。斑馬魚由于其與人類的高度生物相似性,成為了一種有用的藥物開發(fā)模型。如專業(yè)從事斑馬魚臨床前藥物評價(jià)的Zygogen公司,使用ImageXpress系列高內(nèi)涵篩選系統(tǒng)進(jìn)行包括血管生成、毒性篩選等多個應(yīng)用方向的藥物評價(jià),使用斑馬魚模型對化合物進(jìn)行多濃度梯度的劑效關(guān)系的研究,并繪制需要至少十個以上樣品才能準(zhǔn)確擬合的Dose-Response曲線并計(jì)算得到IC50。此外,由于斑馬魚體積小,所以可以放入微孔板中用化合物處理,然后其表型能使用高內(nèi)涵篩選系統(tǒng)來進(jìn)行檢測。

             

            基于斑馬魚的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用有大量的已開發(fā)的人類疾病斑馬魚模型如:
            1.代謝綜合癥:肥胖 (內(nèi)臟肥胖)、 血脂異常、脂肪肝、糖耐受失調(diào)
            2.人類癌癥細(xì)胞異種移植:腫瘤血管生成、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移
            3.循環(huán)疾?。盒牧λソ?、藥物誘導(dǎo)的心率失調(diào)
            4.中央神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào):耳聾、視力障礙、嗅覺失調(diào)、癲癇、發(fā)育紊亂、睡眠喚醒障礙、肌營養(yǎng)不良 (ALS)

                   

                   
            使用ImageXpress系列高內(nèi)涵篩選系統(tǒng)來檢測斑馬魚胚胎模型具備以下三個主要優(yōu)勢:
            :使用完整生命體在三維環(huán)境下幾天就能評價(jià)成千上萬的化合物
            高靈活性:高內(nèi)涵適合篩選很寬范圍的疾病和毒性模型,甚至不局限于斑馬魚
            高質(zhì)量:通過自動化高速堆疊拍攝從頭到尾保持拍攝在合適焦平面,避免景深帶來的不清晰
                   
                                           

            下載實(shí)驗(yàn)案例

             
                   

            參考文獻(xiàn):
            1. Zhang, B., et al., Quantitative phenotyping-based in vivo chemical screening

            in a zebrafish model of leukemia stem cell xenotransplantation, PLoS One,

            2014 Jan 15; 9(1).
            2. Umemoto, N., et al., Fluorescent-based methods for gene knockdown and

            functional cardiac imaging in zebrafish, Mol Biotechnol, 2013 Oct; 55(2): 131-

            42.
            3. Kanungo, J., et al., In vivo imaging and quantitative analysis of changes in

            axon length using transgenic zebrafish embryos. Neurotoxicol Teratol, 2011

            Nov-Dec; 33(6): 618-23.
            4. Diekmann, H., et al., Characterization of optic nerve regeneration using

            transgenic zebrafish. Front Cell Neurosci, 2015 April 9; 9:118.
            5. Huan, H., et al., High-throughput screening for bioactive molecules using

            primary cell culture of transgenic zebrafish embryos. Cell Rep, 2012 Sep 27;

            2(3):695-704.

                   
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