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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格包被操作步驟
閱讀：338 發(fā)布時間：2017-11-1elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格操作步驟:
1. 包被過程(注意設(shè)置空白對照,陰性對照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl, 置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?
2. 封閉酶標反應(yīng)孔:
5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干，洗滌次數(shù)3次
3. 加入待檢測樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測時一般采用1:50-1:400的稀釋度, 應(yīng)采用較大稀釋體積進行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標反應(yīng)孔中,每樣品至少加雙孔, 每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
4. 加入酶標抗體:
酶標抗體: 根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進行. 37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前。
5. 加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):
TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統(tǒng)次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6. 終止反應(yīng):
每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),于20min內(nèi)測定實驗結(jié)果.
7. elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格結(jié)果判斷:
OPD顯色后采用492nm波長,TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測需要450nm波長.檢測時一定要首先進行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測定標本孔的吸收值與一組陰性標本測定孔平均值的比值(P/N)表示,當P/N大于2時作為抗體的效價.(數(shù)值的大小依具體檢測要求而定.)
鹽酸倍他唑標準品 138-92-1 200mg Betazole Hydrochloride
鹽酸苯丙醇胺標準品 154-41-6 250mg
鹽酸苯海拉明標準品 147-24-0 200mg Diphenhydramine Hydrochloride
鹽酸苯海索標準品 52-49-3 200mg Trihexyphenidyl Hydrochloride
鹽酸苯甲嗪標準品 303-25-3 200mg Cyclizine Hydrochloride
鹽酸比哌立登標準品 1235-82-1 200mg Biperiden Hydrochloride
鹽酸吡多辛標準品 58-56-0 200mg
鹽酸吡格列酮標準品 112529-15-4 50mg Pioglitazone Hydrochloride
鹽酸吡哌酯標準品 129-77-1 200mg Piperidolate Hydrochloride
鹽酸芐非他明標準品 5411-22-3 200mg
鹽酸丙胺卡因標準品 1786-81-8 200mg Prilocaine Hydrochloride
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