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            FHs 74 Int (小腸上皮細胞)

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            • FHs 74 Int (小腸上皮細胞)

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            更新時間:2025-02-18 20:31:26瀏覽次數(shù):286

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
            貨號 GOY-01X0579 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
            FHs 74 Int (小腸上皮細胞)的相關(guān)*:GMS10甲基化基因轉(zhuǎn)化感受態(tài)細 1毫升
            GMS10甲基化基因鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細 10X100微升
            GMS10甲基化基因電轉(zhuǎn)感受態(tài)細 5X100微升
            DNA甲基轉(zhuǎn)移(DNMT)總活性連續(xù)循環(huán)比色法 20次
            定量檢測試劑盒
            組蛋白轉(zhuǎn)甲基活性檢測試劑盒(H3-K4) 20次

            詳細介紹

            產(chǎn)品屬性: 

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            FHs 74 Int (小腸上皮細胞)

            1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

            GOY-01X0579

            商品介紹:

            名稱    FHs 74 Int (小腸上皮細胞) 

            別稱FHs74Int; FHs74 Int; 74Int

            年齡(性別)女;3-4個月胚胎

            組織來源小腸

            生長特性貼壁細胞

            細胞形態(tài)上皮細胞樣

            背景描述PAS, negative. The cells are negative for keratin by immunoperoxidase staining.

            生物安全等級1

            生長培養(yǎng)基DMEM10μg/ml Insulin10% FBS1% P/S

            推薦傳代比例1:3-1:4

            推薦換液頻率2~3/

            倍增時間~96-168 hours

            凍存條件

            凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

            溫度:液氮

            培養(yǎng)條件

            氣相:空氣,95%;CO2,5%

            溫度:37℃

            冷凍保存細胞之方法?

            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

            QQ截圖20210907103850.png

            實驗要點及說明:

            1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

            2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

            3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

            4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

            5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

            實驗報告:

            一、分離與培養(yǎng):

            1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

            4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

            二、免疫熒光鑒定:

            1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

            2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

            3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

            4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

            5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

            6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

             DCT 基因全長ORF克隆

             AMY2B 基因全長ORF克隆

             PCYOX1 基因全長ORF克隆

             CYP2S1 基因全長ORF克隆

             CRISPLD1 基因全長ORF克隆

             B3GALNT2 基因全長ORF克隆

             C14orf93 基因全長ORF克隆

             LRRC14 基因全長ORF克隆

             ERLEC1 / C2orf30 基因全長ORF克隆

             MICU1 / CBARA1 基因全長ORF克隆

            FHs 74 Int (小腸上皮細胞)1.56-100 U/L ELISA Kit for Human Tyrosine-protein kinase BTK

            假單胞分離肉湯 英文名稱:Pseudomonas Isolation Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

            0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Islet amyloid polypeptide

            0.156-10 ng/mL 人生長分化因子9(GDF9)ELISA試劑盒

            7.8-500 ng/mL ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 13

            0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA excision repair protein ERCC-1

            硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:100ml*20瓶

            0.156-10 ng/mL 人促黃體生成素亞基β(Lutropin beta chain)ELISA試劑盒

            0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Serine/arginine-rich splicing factor 1

            0.156-10 ng/ml 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

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