小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：L929細(xì)胞，小鼠肺成纖維細(xì)胞 SGC7901(胃腺癌細(xì)胞) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6 hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞) SMMC-7721細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞系,Wish細(xì)胞 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 人胚胎肺成纖維細(xì)胞 兔原代心房心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代口腔黏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

商品屬性：

小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CIDEB peptide CIDEB抗原 0.5mgCIDEB peptide CIDEB抗原

HOXA1 Protein Human 重組人 HOXA1 蛋白

SFRP4重組小鼠 sFRP4 蛋白 Protein

SERPINF2 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF2 蛋白

AKR1B1重組人 AKR1B1 蛋白 Protein

大鼠三0酸肌醇(IP3)試劑盒 ，英文名： IP3 ELISA Kit

Mouse androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 小鼠雄(ASD)試劑盒

RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHA(Humanhemagglinin)ELISAKit人血凝素

細(xì)胞半胱蛋白酶-9(CASPASE-9)活性熒光定量試劑盒20次

RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔交聯(lián)物(PY)試劑盒   96T/48T

兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒   96T/48T

兔白細(xì)胞介素-35（IL-35）試劑盒   96T/48T

兔白細(xì)胞介素-35（IL-35）試劑盒   96T/48T

小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vitamin A (VA) ELISA Kit 大鼠A(VA)試劑盒

HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 人生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollectin試劑盒人膠原凝集素(Collectin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織Akt1/PKBa激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinE,FcεRⅡELISAKitEFc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)試劑盒規(guī)格：96T/48T

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框70抗體

蛋白質(zhì)精亞型6抗體

小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基SFRP4重組小鼠 sFRP4 蛋白 Protein

CIDEB peptide CIDEB抗原 0.5mgCIDEB peptide CIDEB抗原

AKR1B1重組人 AKR1B1 蛋白 Protein

HOXA1 Protein Human 重組人 HOXA1 蛋白

SERPINF2 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF2 蛋白

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。