人原代毛囊干細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：L929 小鼠成纖維細胞 豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02 XCL2 Others Human 人 XCL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 AMY2A Others Cynomolgus 食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 人細胞裂解液 BMPR1A 兔原代心肌成纖維細胞培養(yǎng)基 豬原代膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)基

人原代毛囊干細胞專用培養(yǎng)基

人原代毛囊干細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代毛囊干細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代毛囊干細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代毛囊干細胞胞的培養(yǎng)。

 

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)重組蛋白 Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)

CSNK2A1 Protein Human 重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白

EDEM2重組人 EDEM2 / C20orf31 蛋白 Protein

大鼠三葉因子1(TFF1)試劑盒 ，英文名： TFF1 ELISA Kit

Mouse sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒

RatEndotheliallipase,ELELISAKit 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHA(MouseHyaluronicacid)ELISAKit小鼠透明質(zhì)酸

細胞半胱蛋白酶-8(CASPASE-8)活性熒光定量試劑盒20次

RatVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠活化蛋白C(APC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠(ypsin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠尿微量白蛋白(ALB)試劑盒 96T/48T

Rat parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒

Humandynorphin,DynELISAKit 人強啡肽(Dyn)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human25-DihydroxyvitaminD3,HVD3試劑盒人25羥基3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性比色法定量試劑盒20次

MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit小鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-羥色胺受體7抗體

蛋白酶激活受體4抗體

人原代毛囊干細胞專用培養(yǎng)基SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)重組蛋白 Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)

EDEM2重組人 EDEM2 / C20orf31 蛋白 Protein

CSNK2A1 Protein Human 重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。