詳細介紹
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi),補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 豬原代垂體細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3913 |
豬原代垂體細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持豬原代垂體細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含豬原代垂體細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于豬原代垂體細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
注意事項:
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心。
棄上清,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標記,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta 0.5mgActin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動蛋白(抗原)
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標簽)
ENPP2重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標簽) Protein
ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標簽)
ANTXR1重組人 ANTXR1 蛋白 Protein
大鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒 ,英文名: iFABP ELISA Kit
Mouse FMS like tyrosine kinase 3 ligand (Flt3L) ELISA Kit 小鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)試劑盒
ELISA 小鼠粒細胞集落刺激因子(mouse G-CSF) 進口分裝
CLIAKitforLDLELISAKit大鼠低密度脂蛋白
通用型N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKiths-CRP猴超敏C反應蛋白
蝦胺/酚乙醇胺 英文名稱: Octopamine 規(guī)格: 英文縮寫: OPM
河蟹5羥色胺 英文名稱: 5-Hydroxyyptamine 規(guī)格: 英文縮寫: 5-HT
鱸魚 英文名稱: Coisol 規(guī)格: 英文縮寫: CO
鱸魚/胞壁質酶 英文名稱: Lysozyme /Muramidase 規(guī)格: 英文縮寫: Lysozyme
小鼠多瘤病毒(POLY)試劑盒
Rayon, hemagglinin (FHA) ELISA Kit 人絲狀血球凝集素(FHA)試劑盒
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒 進口分裝
HumanAquaporin1,AQP-1試劑盒人水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
植物乙酰乙酰轉移酶(ACAT)活性比色法定量試劑盒20次
Humaissuefactor,IFELISAKit人組織因子(TF)試劑盒
PAP1結合蛋白抗體
環(huán)指蛋白113B抗體
豬原代垂體細胞專用培養(yǎng)基ART4重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 Protein
促胰液素(SCT)重組蛋白 Recombinant Secretin (SCT)
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標簽)
IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白