詳細介紹
人原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3834 |
人原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代基質(zhì)細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代基質(zhì)細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
注意事項
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機 | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml、5ml、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃;
2) 準備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱;
3) 戴上護目鏡,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞,盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,混勻后,1000rpm 離心 5min;
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,寫上細胞名稱、日期,再加入 4ml 培養(yǎng)基;
6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 (細胞傳代建議一傳二)
1) 當(dāng)細胞匯合度達到 85%以上時,可進行傳代。
2) 在生物安全柜內(nèi),打開培養(yǎng)瓶瓶口,收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基;
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,吸棄 PBS;
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,將懸液吸入 15ml 離心管;
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基;
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③);向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,95%左右細胞脫。
6) 1000rpm 離心 5min;
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,各加入 4ml培養(yǎng)基。
8) 離心完成后,棄上清,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,每個培養(yǎng)瓶各 1ml;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,震蕩混勻后,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中;
8)將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫;
9)第二天,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。
NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受體2C(多肽)
CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白
GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein
GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白
CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)試劑盒 ,英文名: AIF ELISA Kit
Porcine orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 豬食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒
大豆特定基因序列(Lectin)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLTB(HumanlymphotoxinBeta)ELISAKit人淋巴毒素β
體液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitHSP-20雞熱休克蛋白20
血管內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R3) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
sVE-Cadherin 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
小鼠 ACTH(mouse ACTH) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Phoenix
mouse Activin A 作用: ELISA 規(guī)格: 96T
小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human Coxsackie virus IgM (Cox V-IgM) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)試劑盒
HumanHirudinELISAKit 人水蛭素(Hirudin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor8-epi-PGF2Alpha(Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha)ELISAKit兔8-異構(gòu)前列腺素
銀染法細胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次
MouseMethemoglobin,MHBELISAKit小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
胞漿蛋白PACSIN3抗體
RhoA重組兔單克隆抗體
人原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein
NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受體2C(多肽)
CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein
CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白
GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套,戴口罩、手套。
?器材滅菌?:玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,定期檢查氣體濃度與流量,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。