類鼻疽伯克霍爾德菌（PP）核酸檢測試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

類鼻疽伯克霍爾德菌(PP)核酸檢測試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
類鼻疽伯克霍爾德菌(PP)核酸檢測試劑盒方法	48T	PCR檢測試劑盒

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
類鼻疽伯克霍爾德菌(PP)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

鹽啉胍英文名稱：Guanidine hydrochlorideCAS號(hào)：3160-91-6分子式：207.66分子量： C6H14ClN5O

6-溴-4-羥-2-(三氟甲)喹啉分子式：292.05分子量： C10H5BrF3NO英文名稱：6- -4- (three) -2-CAS號(hào)：1701-22-0

5,10,15,20-四(4-吡)-21H,23H-卟啉分子式：618.69分子量： C40H26N8英文名稱：5,10,15,20- four (4-) -21H, 23H- porphyrinCAS號(hào)：16834-13-2

BOC-3,5-DIIODO-TYR-OSU英文名稱：BOC-3,5-DIIODO-TYR-OSUCAS號(hào)：163679-35-4分子式：630.17分子量： C18H20I2N2O7

茵芋苷英文名稱：SkimminCAS號(hào)：93-39-0分子式：324.28274分子量：C15H16O8

四甲酰分子式：144.09分子量： C4H4N2O4英文名稱：Tetra acyl hydrazineCAS號(hào)：52023-52-6

4-硝-7-并氧雜惡二唑英文名稱：4- nitro -7- piperazine benzo oxa evil two triazoleCAS號(hào)：139332-66-4分子式：249.23分子量： C10H11N5O3

異丁丁酯英文名稱：Butyl butyrateCAS號(hào)：97-87-0分子式：144.21分子量： C8H16O2

1,3-二甲-6-脲嘧分子式：155.15分子量： C6H9N3O2英文名稱：1,3- two methyl -6-CAS號(hào)：6642-31-5

4,6-二羥-5-溴嘧分子式：190.98分子量： C4H3BrN2O2英文名稱：4,6- two hydroxy -5-CAS號(hào)：15726-38-2

鋁試劑英文名稱：Aluminum ReagentCAS號(hào)：569-58-4分子式：473.43分子量： C22H23N3O9；C22

類鼻疽伯克霍爾德菌(PP)核酸檢測試劑盒方法SMEK2/PP4R3B  絲氨酸/蘇氨酸蛋酸酶3B抗體 0.2ml

Caspase 8  半胱氨酸蛋白酶8抗體 0.1ml

Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180)  磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體 0.1ml

SLK/Fyn  酪氨酸蛋白激酶Fyn（同步原癌基因）抗體 0.2ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

phospho-SYN1(Ser603)   磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml

GPR70/T1R1  蛋白偶聯(lián)受體70抗體 0.2ml

phospho-Dnmt1(Tyr969)  磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.1ml

CNKSR2  Ras激酶抑制因子連接增強(qiáng)蛋白2抗體 0.2ml

phospho-MCAM(Tyr641)  磷酸化黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗體 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。