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            北京百奧創(chuàng)新科技有限公司

            細(xì)胞表面染色實驗操作流程是什么?

            時間:2023-10-20 閱讀:1035
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            你知道細(xì)胞表面染色實驗操作流程是什么嗎?讓我們一起來看看吧!

            一、細(xì)胞計數(shù)

            將培養(yǎng)好的細(xì)胞收集于15mL離心管并計數(shù);500g離心4min,去上清。

            二、制備單細(xì)胞懸液

            將收集的細(xì)胞用1mL 0.5%BSA/PBS溶液重懸,400g離心3min,去上清,重復(fù)2次;用0.5%BSA/PBS溶液重懸細(xì)胞至濃度1x106個細(xì)胞/mL,分配到96孔板中,每孔100μl細(xì)胞懸液。

            三、阻斷Fc受體

            室溫孵育10-20min。

            四、一抗孵育

            每孔加入稀釋后的一抗溶液100μl,2-8℃反應(yīng)30min

            五、洗滌

            400g離心5min,去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸,離心去上清,重復(fù)兩遍。

            六、二抗孵育

            對于非熒光染料直標(biāo)抗體,加入100μl熒光二抗重懸,避光2-8℃反應(yīng)30min。對于直標(biāo)抗體直接跳到步驟八。

            七、洗滌

            400g離心5min,去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸,離心去上清,重復(fù)兩遍。

            八、重懸細(xì)胞

            200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸細(xì)胞,4℃保存,上機(jī)分析。

            更多有關(guān)細(xì)胞表面染色實驗的操作流程,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:



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