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            上海仁捷生物科技有限公司

            中級(jí)會(huì)員·9年

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            人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒價(jià)格調(diào)整

            2017-3-28  閱讀(1748)

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            人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(CTRP1)ELISA試劑盒價(jià)格調(diào)整

            人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(CTRP1)ELISA試劑盒價(jià)格調(diào)整

            人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(CTRP1)ELISA試劑盒價(jià)格調(diào)整

            96T 原價(jià)2300元 現(xiàn)價(jià)2100元

            48T 原價(jià)1800元 現(xiàn)價(jià)1600元(折扣請)

            試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1CTRP1)的含量。

            有效期:6個(gè)月

            保存條件:2-8℃

            本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

             

             

             

            實(shí)驗(yàn)原理

            試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1CTRP1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1CTRP1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
            樣本處理及要求

            1.  血清將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
            2.  血漿用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
            3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

            4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

            注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

             

            需要而未提供的試劑和器材

            • 酶標(biāo)儀(450nm)
            • 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
            • 37℃恒溫箱
            • 蒸餾水或去離子水

             

            試劑盒組成

            名稱

            96孔配置

            48孔配置

            備注

            微孔酶標(biāo)板

            8孔×12

            8孔×6

            標(biāo)準(zhǔn)品

            0.3mL*6管

            0.3mL*6管

            樣本稀釋液

            6mL

            3mL

            檢測抗體-HRP

            10mL

            5mL

            20×洗滌緩沖液

            25mL

            15mL

            按說明書進(jìn)行稀釋

            底物A

            6mL

            3mL

            底物B

            6mL

            3mL

            終止液

            6mL

            3mL

            封板膜

            2張

            2張

            說明書

            1份

            1份

            自封袋

            1個(gè)

            1個(gè)

            1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:20、10、5、2.5、1.25、0 ng/mL

            2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

             

            注意事項(xiàng)

            • 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
            • 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
            • 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
            • 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
            • 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
            • 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
            • 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
            • 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
            • 不能使用過期產(chǎn)品。
            • 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置

             

            試劑準(zhǔn)備

            試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

            20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

             

            操作步驟

            1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
            2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
            3.   樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。
            4.   除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
            5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
            6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
            7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

             

            實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

            所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品濃度。

             

            試劑盒性能

            •  檢測范圍0.625 ng/mL  20 ng/mL。
            •  靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
            •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
            •  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

             

            說明

            • 由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。
            • zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
            • 不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時(shí)間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,電子版說明書僅作參考。
            • 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到*的檢測結(jié)果。

             

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