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過(guò)碘酸雪夫反應(yīng)（PAS）——顯示細(xì)胞內(nèi)糖原資料說(shuō)明
閱讀：2791 發(fā)布時(shí)間：2017-3-14| 提 供 商 | 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 7.9KB |
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(一)原理
組織、細(xì)胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法來(lái)顯示，其化學(xué)基礎(chǔ)是利用過(guò)碘酸的氧化作用，打開(kāi)碳鏈形成醛，生成的醛基與Schiff試劑中的無(wú)色品紅反應(yīng)形成紫紅色化合物。
(二)方法
l．取l~2mm厚的肝組織塊，用Carnoy氏液4℃固定4～6小時(shí)。
2．乙醇脫水、二甲苯透明。石蠟包埋，切片。
3．用70％乙醇展片。
4．脫蠟：二甲苯(1)5分鐘→二甲苯(2)5分鐘→100％乙醇5分鐘→含1％火棉膠的乙醇液1分鐘→70％乙醇1分鐘。
5．直接浸入過(guò)碘酸酒精液反應(yīng)5～15分鐘，經(jīng)70％乙醇洗片刻。
6．浸入Schiff氏酒精液反應(yīng)15分鐘。
7．亞硫酸水洗三次，以洗去多余的非特異性結(jié)合的色素，以及擴(kuò)散的染料。
8．流水沖洗3～5分鐘。
9．蒸餾水洗。
10．浸入Ehrlich蘇木精復(fù)染20~30秒，使細(xì)胞核著色。
11．脫水：95％乙醇3分鐘二次→100％乙醇3分鐘二次→二甲苯透明10分鐘二次。
12．加蓋片鏡檢或樹(shù)膠封固后鏡檢。
(三)結(jié)果
細(xì)胞中呈紫紅的顆粒即為糖原。