Polo-like kinase1抑制劑公司正在出售的產(chǎn)品：MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit 人黑色抗體2,4-二氟苯 99%
TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體3,4-二氧苯 99%
P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

小葉相思根瘤菌磷化絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗體Human MINK1 ELISA Kit免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)

束型青霉磷化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體Human MIPEP ELISA Kit免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)

天津李時(shí)珍氏菌嗜粒趨化蛋白22抗體Human MIPOL1 ELISA Kit免疫球蛋白輕鏈kappa(κ-IgLC)

金格桿菌甲硫腦啡肽抗體Human MKL1(MKL/myocardin-like protein 1) ELISA Kit免疫球蛋白結(jié)合蛋白(BIP)

橄欖色硬膜鏈霉菌抗體Human MITD1 ELISA Kit免疫球蛋白γ-1鏈C區(qū)(IGHGI)

粉樹孢基質(zhì)金屬蛋白9抗體Human Mitofilin ELISA Kit免疫球蛋白M(IgM)

Sphingomonas panni 原癌基因M-ras抗體Human F12(Coagulation factor XII) ELISA Kit免疫球蛋白j鏈(Ig-j)

魯氏接合酵母單核趨化蛋白1抗體Human MKNK2 ELISA Kit免疫球蛋白G4(IgG4)

雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)抗體Human MFN1 ELISA Kit免疫球蛋白G3(IgG3)

漢遜德巴利酵母雞支原體抗體Human METT10D ELISA Kit免疫球蛋白G1(IgG1)

蘇云金芽胞桿菌熊本亞種線粒體轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human MED4 ELISA Kit免疫球蛋白G(IgG)

荔枝有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體Human MED6 ELISA Kit免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)

東方伊薩酵母膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體Human MEF2A ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)

色串孢屬粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human MED8 ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)

棲果盤孢粘膜血管定居因子抗體Human MEIS3 ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)

停滯棒桿菌抑癌基因抗體Human MUC5B(Mucin-5B) ELISA Kit免疫球蛋白E(IgE)

粗皮側(cè)耳（平菇）Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR鹽小檗堿

基桿菌Phenylobacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鹽青藤堿

幽門螺桿菌Helicobacter│pylori 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR巖白菜
Polo-like kinase1抑制劑大腸桿 4,5-二基-2-氨基咪唑布魯氏桿Elisa

毛柄(金針菇) 4-甲苯磺酰異酸酯包蟲病IgG抗體Elisa

嗜糞細(xì)薄 4-基-4'-戊基聯(lián)苯磷酸二酯5Elisa

蘇云金芽孢桿九州亞種 3-巰基-2-丁酮程序性死亡配體-1抗體Elisa

擴(kuò)展鐮孢 (S)-(+)-酮基蒎酸尿酸Elisa

根瘤 1-溴-4-三氟甲氧基苯沙門氏抗體Elisa

苦白蹄 4-正基環(huán)己酮布魯氏IgG抗體Elisa

福氏志賀氏 4-氟苯乙烯溶Elisa

黃曲霉 對(duì)氟血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子BElisa

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 3-氟-4-羥基苯甲促甲狀腺釋放Elisa

賴氨酸芽孢桿 6-氨基-1-己喹啉酸Elisa

潮汐科維爾氏 3-氟苯甲干因子Elisa

蘇云金芽孢桿 對(duì)氟苯甲酰肝生長(zhǎng)因子Elisa

綠色木霉 2-氟-4-甲酸神經(jīng)氨酸Elisa

茶樹菇 2-氟異煙酸球蛋白G2aElisa