公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶DOT1L抑制劑
英文名稱:SGC0946
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SGC0946是組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶DOT1L高效選擇性抑制劑,IC50值為0.3nM,有效抑制混合系白血病細(xì)胞。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1561178-17-3 純度:98.48% 分子量:618.57 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
孟氏假單胞菌端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體Anti-HMGN2 Antibody微管蛋白β6(TUBβ6)
大腸埃希菌甲狀腺激反應(yīng)蛋白抗體Anti-HMGB4 Antibody微管蛋白β4(TUBβ4)
雞傷寒沙門(mén)氏菌跨膜蛋白49抗體Anti-HMOX1 Antibody微管蛋白β3(TUBβ3)
微小桿菌腫瘤蛋白D54蛋白抗體Anti-HMMR Antibody微管蛋白β1(TUBβ1)
串珠鐮孢四環(huán)抗體Anti-HMOX1 Antibody(PB0212)微管蛋白β(TUBβ)
交替紅色桿菌屬腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體Anti-HNF1A Antibody微管蛋白α8(TUBα8)
矮被孢霉踝蛋白抗體Anti-HMOX2 Antibody(PB0213)網(wǎng)狀蛋白4受體(RTN4R)
金耳磷化踝蛋白抗體Anti-HMOX1(HO-1) Antibody網(wǎng)狀蛋白4(RTN4)
釀酒酵母驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體Anti-HNRNPD Antibody網(wǎng)狀蛋白3(RTN3)
豇豆慢生根瘤菌瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白6抗體Anti-HNF1B Antibody網(wǎng)狀蛋白2(RTN2)
藤倉(cāng)鐮孢磷化微管相關(guān)蛋白抗體Anti-HNRNPA1 Antibody網(wǎng)狀蛋白1(RTN1)
布魯氏菌 生物Ⅱ型四分子交聯(lián)體5抗體Anti-HNRNPA2B1 Antibody網(wǎng)格蛋白交互子1(CLINT1)
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢熱休克蛋白75抗體Anti-HNF4A Antibody(PB0211)網(wǎng)鈣蛋白3(RCN3)
副豬嗜血桿菌腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體Anti-HNRNPF Antibody網(wǎng)鈣蛋白2(RCN2)
粉紅單端孢霉四分子交聯(lián)體15抗體(四旋蛋白)Anti-HNRNPH1 Antibody網(wǎng)鈣蛋白1(RCN1)
Oerskovia enterophila腱調(diào)蛋白抗體(軟骨調(diào)節(jié)樣1蛋白)Anti-HO-2(HMOX2) Antibody網(wǎng)蛋白(PLEC)
神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白1抗體葡枝根霉人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
多配體聚糖結(jié)合蛋白1抗體乳乳球菌人小腦顆粒細(xì)胞
磷肌磷蛋白INPP5G抗體產(chǎn)短桿菌人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞
磷肌磷蛋白INPP5H抗體沙雷氏菌屬人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞
組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶DOT1L抑制劑豬鏈球 六價(jià)鉻/Cr(Ⅵ)過(guò)氧化物Elisa
白僵 2--3,5-二硝基三氟甲苯葡萄糖苷Elisa
栗疫病 鉻/Cr5脂加氧Elisa
細(xì)交鏈孢霉 鈷/Co5脂加氧Elisa
發(fā)酵成對(duì)桿 脫氧熊果苷半胱氨酸蛋白9Elisa
解脂假絲酵母 L-抗壞血酸-2-磷酸酯鎂色CElisa
麥根腐平臍蠕孢 鎘/Cd分泌型球蛋白GElisa
類(lèi)馬鏈球 大茴香油顆粒BElisa
副豬嗜血桿 柚皮苷二氫查爾酮穿孔;成孔蛋白Elisa
枯草芽孢桿 甘草酸輸血傳播病Elisa
黏液桿 托吡酯胰島生長(zhǎng)因子1Elisa
蒼黃鏈霉 愈創(chuàng)奧肌苷酸Elisa
禽腺病Ⅰ型 鈣/Ca酮戊二酸脫氫復(fù)合體Elisa
野尻鏈霉 鉍/Bi檸檬酸合Elisa
球色單隔孢屬 羥基瓜爾膠異檸檬酸脫氫Elisa