天狼星紅染色液公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、小鼠化非受體酪氨激c-Abl抗體IgGBOC-D-絲氨酯 98%
Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化組蛋白去?；?抗體IgGDL-半胱氨鹽鹽,一水 98%
CAD/CPAN/FITC 熒光標(biāo)記Caspase 激活的脫氧核糖核抗體IgGDL-胱

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

常春藤苷D英文名稱： Quinine hydrochloride dihydrate支架蛋白抗體包裝5g

常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷英文名稱： 1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE非洲爪蟾IGC抗體包裝25g

常春藤皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Picoplatin干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體包裝5g

常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷英文名稱： 4-NitrobenziMidaMide HCl干擾β抗體包裝100g

常山（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ureaγ-干擾/γ-IFN單克抗體包裝25g

巢脾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dehydronandrolon干擾-γ/IFN-γ抗體包裝5g

朝藿定A(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fumaric acid干擾-γ/IFN-γ抗體包裝1g

朝藿定A1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Danofloxacin mesylate胰島樣生長(zhǎng)因子I受體抗體包裝5g

朝藿定C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Danofloxacin mesylate胰島樣生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝1g

車前草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium Alginate胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2抗體包裝25g

車前草（車前）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Mephenoxalone胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5抗體包裝5g

車前草苷D英文名稱： Lecithin胰島樣生長(zhǎng)因子1抗體包裝250mg

車前子（車前）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Lecithin from egg胰島樣生長(zhǎng)因子-II抗體包裝1g

車葉草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vilanterol;GW642444白介10抗體包裝5g

沉香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PD-98059白介13抗體包裝100mg

優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質(zhì)量規(guī)格：?jiǎn)熙ズ看笥?0%可溶性胸苷激1試劑盒槲皮-7-O-葡萄糖苷;Quercet

: AS1.16資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：純度≥50%,油狀液體可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1試劑盒葒草苷;Orientin

球孢鏈霉菌Streptomyces│globisporus 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%,BR可溶性間皮相關(guān)肽試劑盒;Tetrodotoxin
天狼星紅染色液假單胞屬 5-氟靛紅果糖-1,6-二磷酸Elisa

平菇新農(nóng)1號(hào) 2-氯異煙酸甲酯甜菜堿脫氫Elisa

沙針草狀孢 硬脂酰苯甲酰5-磷酸核糖激Elisa

灰紅鏈霉 2-巰基四氫-1,3-噁唑檸檬酸裂解Elisa

茄拉爾氏 5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉轉(zhuǎn)移Elisa

膠質(zhì)芽孢桿* 2-溴-5-羥基多Elisa

釀酒酵母 2-溴-4-葡萄糖脫氫Elisa

紅法夫酵母* 2-羥基-3-氯-5-溴吡啶鈣調(diào)蛋白Elisa

布萊克威爾假絲酵母 5-氨基-1-(2-)-1H-吡唑-4-甲酸谷氨酰合成2Elisa

豬丹絲 鏈霉內(nèi)肽Elisa

枯草芽孢桿 3-溴-2-乙氧基吡啶α-L阿拉伯呋喃糖苷Elisa

馬腸鏈球 2-氯-3-甲基喹啉β半乳糖苷Elisa

木蹄層孔 2-吡甲胰蛋白Elisa

蘇云金芽孢桿 3-氨基苯并呋喃-2-甲酸甲酯胰蛋白抑制劑Elisa

弗雷德里克斯堡假單胞 N-叔丁氧羰基-4-乙基-4-甲酸甲酯水解Elisa