Wnt加工和分泌抑制劑(IWP-2)公司正在出售的產(chǎn)品：Hp-IgM(Human Helicobacter pylori IgM) ELISA Kit 人幽門(mén)螺旋桿菌IgM4'-酮 99%
CagA(Human Cytotoxin-associated protein) ELISA Kit 人相關(guān)蛋白A二氫芳樟 95%
GIP(Human gastric inhibitory polypept

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

芽胞桿菌ATCC 9372；（曾用名：枯草芽胞桿菌黑色變種）單酰甘油脂肪抗體Human SESN1(Sestrin-1) ELISA Kit利尿肽(KP)

枯草芽孢桿菌致癌基因n-Myc抗體Human GHRH(Somatoliberin) ELISA Kit冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白(CIRBP)

戊糖乳桿菌多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體Human CGB(CGβ(Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit) ELISA Kit冷球蛋白(CG)

枯草芽孢桿菌線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) ELISA Kit類(lèi)粘蛋白2(ORM2)

拱狀靈芝蛋白激MST2抗體Human SFRP2(Secreted frizzled-related protein 2) ELISA Kit類(lèi)粘蛋白(ORM)

*灰葡萄孢DNA結(jié)合蛋白C抗體Human IFNGR1(Interferon gamma receptor 1) ELISA Kit類(lèi)似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)

Chitinophagaceae sp.胃粘液抗體Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) ELISA Kit類(lèi)肌腱蛋白c(TNC)

巴氏醋桿菌巴氏亞種促黑激γ抗體Human CSTA(Cystatin-A) ELISA Kit類(lèi)肌腱蛋白(TN)

阪崎腸桿菌抗體Human NAA20(N-alpha-acetyltransferase 20) ELISA Kit類(lèi)固抗體(SCA)

類(lèi)干酪乳桿菌結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) ELISA Kit類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)

囊狀匐柄霉組織相容性復(fù)合體β抗體Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) ELISA Kit類(lèi)白抗原G(HLA-G)

香菇Myc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) ELISA Kit類(lèi)白抗原E(HLA-E)

蘇云金芽孢桿菌糖蛋白gp330抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) ELISA Kit類(lèi)白抗原C(HLA-C)

人參土地桿菌磷化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體Human SESN1(Sestrin-1) ELISA Kit類(lèi)白抗原B27(HLA-B27)

Rhizobium vitis造血祖激1抗體Human GHRH(Somatoliberin) ELISA Kit類(lèi)白抗原A(HLA-A)

大腸埃希氏桿菌絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human PDE4B(cAMP-specific 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 4B) ELISA Kit雷帕霉靶蛋白(mTOR)

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR楊苷

型副傷寒沙門(mén)氏菌Salmonella│paratyphiA 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR酚

木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BR，日本進(jìn)口分裝麝香
Wnt加工和分泌抑制劑(IWP-2)大腸埃希氏 對(duì)甲苯磺酰甲基異促黃體Elisa

竹針孢座囊 呋喃酮促卵泡Elisa

*血紅鉚釘菇(又名松傘) 2--4,6-二氟苯促性腺釋放Elisa

油桐盾殼霉 2′,4′-二氟苯乙酮催乳Elisa

柔毛鏈霉 4-氟-2-睪酮Elisa

尖孢鐮刀 3-羧基環(huán)丁骨保護(hù)Elisa

秀珍菇 3-氟鄰苯二酚骨鈣Elisa

蠟狀芽孢桿 Piroxicam骨堿性磷酸Elisa

蘇云金芽孢桿松蠋亞種 2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶敏感性脂肪Elisa

鏈霉鏈霉 2',3'-異叉鳥(niǎo)苷甲狀腺Elisa

枯草芽孢桿 2',3'-異叉腺苷磷酸烯式酮酸羧激Elisa

膠孢鐮孢 N-丁基苯磺酰球蛋白AElisa

蘇云金芽孢桿 二甲氨基乙縮二乙球蛋白GElisa

釀酒酵母 2,5-二-3-乙?；绶郧虻鞍譓Elisa

卵形巴貝斯蟲(chóng)（文縣株） D(+)巖藻糖蘋(píng)果酸脫氫Elisa