Akt抑制劑(Perifosine)公司*的產(chǎn)品：GsaR(Human gastrin receptor) ELISA Kit 人促胃液受體瓊脂 BR
CCK-8(Human cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 人膽囊收縮/縮膽囊八肽α-淀粉 BR
TAP(Human trypsinogen activation peptide) ELISA K

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：Akt抑制劑(Perifosine)

英文名稱(chēng)：Perifosine

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Corynebacterium variabile磷化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體Human HSF1(Heat shock factor protein 1) ELISA Kit酪酰tRNA合成(YARS)

米根霉磷化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體Human PDE5A(cGMP-specific 3′,5′-cyclic phosphodiesterase) ELISA Kit酪酰DNA磷二酯1(TDP1)

薔薇放線孢磷化絲裂原活化蛋白激3抗體Human IFNGR1(Interferon gamma receptor 1) ELISA Kit酪羥化(TH)

海洋青銅小單孢菌磷化絲裂原活化蛋白激激2抗體Human SOX2(Transcription factor SOX-2) ELISA Kit酪激2(Tyk-2)

玫煙色棒束孢磷化肌特異性增強(qiáng)因子2D抗體Human SHBG(Sex hormone-binding globulin) ELISA Kit酪蛋白激受體TYRO3(TYRO3)

大腸埃希氏菌磷化肌特異性增強(qiáng)因子2D抗體Human FGF5(Fibroblast growth factor 5) ELISA Kit狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)

赭色擲孢酵母磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human TAC1(Protachykinin-1) ELISA Kit蘭尼堿受體2(RYR2)

廣東頸槽蛇菌磷化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體Human HMGB1(High mobility group protein B1) ELISA Kit賴酰氧化(LOX)

鹽地桿菌磷化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體Human SHBG(Sex hormone-binding globulin) ELISA Kit賴特異性脫甲基5A(JARID1A)

黑曲霉磷化造血祖激抗體Human FGF5(Fibroblast growth factor 5) ELISA Kit萊姆IgG(Lyme-IgG)

微小桿菌p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體Human HMGB1(High mobility group protein B1) ELISA Kit醌NADH脫氫1(NQO1)

小馬勃5-1肌特異性增強(qiáng)因子2D抗體Human FADS2(Fatty acid desaturase 2) ELISA Kit跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11(MS4A11)

英杜被孢霉磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human MAX(Protein max) ELISA Kit空泡相關(guān)蛋白A(VacA)

釀酒酵母磷化蛋白激C底物Marcks抗體Human APH1A(Gamma-secretase subunit APH-1A) ELISA Kit空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)

盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢髓易位基因相關(guān)蛋白1抗體Human TBX1(T-box transcription factor TBX1) ELISA Kit克雷白氏桿菌(klebsiella)

淡紅擬口蘑巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS6抗體Human PLA2G6(85 kDa calcium-independent phospholipase A2) ELISA Kit克拉拉蛋白(CC16)

海莖狀菌Maricaulis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：活1:250,BR蛇床子

ATCC6275=CBS131.52=IMI45551資源名稱(chēng): 泡盛曲霉 質(zhì)量規(guī)格：800u/mg原薯蕷皂苷

植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格：2000u/mg;200萬(wàn)u/g薯蕷皂苷
Akt抑制劑(Perifosine)白令海芽孢桿 N-芐基酮葡萄糖-6-磷酸Elisa

梨生囊孢殼 (3-溴基)三苯基溴化膦葡萄糖-6-磷酸脫氫Elisa

美澳型核果褐腐病 1,3-二氨基胍鹽酸鹽羥甲基戊二酸單酰Elisa

地衣芽孢桿 菁綠羥甲基戊二酸單酰合成Elisa

親和鏈霉 苯氧乙酸鈉羥脯氨酸Elisa

絲膜屬 9,10-二氫-9-氧雜-10-磷雜菲-10-氧化物乳酸脫氫Elisa

氧化亞鐵酸硫桿（暫不提供） BOC-L-精氨酸鹽酸鹽乳鐵蛋白Elisa

微白諾卡氏 芐基甲基生長(zhǎng)Elisa

芽孢桿 Tiglyl Glycine褪黑Elisa

片球?qū)?/span> 三氟磺酸酐維生K1Elisa

Laceyella 2-甲基噻唑纖溶原激活物抑制因子1Elisa

豬鏈球 4-辛基雄Elisa

彎孢 鉻變FB血漿α顆粒膜蛋白Elisa

大腸埃希 五氟酸酐胰島Elisa

庫(kù)爾勒海洋桿 膽固硬脂酸酯胰島樣生長(zhǎng)因子1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)