細胞膜染色試劑CM-Dil公司*的產(chǎn)品：Phospho-Stat2 (Tyr690) 化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體3,5-二-2-羥苯磺鈉 99%
STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗體N-羥琥珀酰亞 98%
phospho-STAT3 (Thr705) 化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體N-代丁二酰亞 97%
phospho-STAT3 (Ser727) 化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：細胞膜染色試劑CM-Dil

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：200μl

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Molecular sieves, 3 ?鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白X抗體包裝5g

蘆筍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 3 ?GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝1g

蘆竹根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 3 ?γ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈2抗體包裝250mg

蘆竹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Molecular sieves, 4 ?原鈣粘蛋白γA1抗體包裝5g

魯斯考皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體70抗體包裝1g

鹿角（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體71抗體包裝5g

鹿茸（馬鹿）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?谷受體δ2/GluR-δ2抗體包裝25g

鹿茸（梅花鹿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體包裝5g

鹿銜草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?谷脫羧67抗體包裝1g

路邊青（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?生長抑制DNA損傷基因45抗體包裝25g

路路通內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?胃泌抑制肽抗體包裝5g

路路通（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4抗體包裝1g

綠包藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?磷脂酰基蛋白聚糖-3抗體包裝5g

綠茶（茶葉）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?糖皮質(zhì)激受體抗體包裝1g

綠萍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?胰高血糖樣肽-1抗體包裝5g

: Robinson資源名稱: 問號狀鉤端螺旋體 質(zhì)量規(guī)格：>95%前列腺E2試劑盒毛萼結(jié); Maoecrystal A

球毛殼霉Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于培養(yǎng)前列腺E1試劑盒莫諾宗 ;4-Benzyloxyphe

: ATCC35106資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前列腺D合成試劑盒馬錢堿;Brucine
細胞膜染色試劑CM-Dil大麗花輪枝孢 3-(Boc-氨甲基)氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽性別決定區(qū)Y框蛋白1Elisa

布魯氏?。?/span>+）陽性血清 1-[2-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol骨骼肌肌動蛋白α1Elisa

孟氏假單胞 D-高苯氨酸乙酯鹽酸鹽心肌肌鈣蛋白TElisa

香菇 β-1,3-葡聚糖α橫紋肌肌動蛋白Elisa

莫氏克羅諾桿 Amberlyst® A21 大孔樹脂脊髓灰質(zhì)炎病抗體Elisa

醋化醋桿 聚D-230乙型流感嗜血桿抗體Elisa

戴爾根霉 果聚糖腦膜炎雙球抗體Elisa

紅霉鏈霉 微球核酸 來源于金黃色葡萄球(株ATCC #27735)囊泡單轉(zhuǎn)運蛋白2Elisa

釀酒酵母 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)無翅型MMTV整合位點家族成員11Elisa

土曲霉 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)多巴轉(zhuǎn)運蛋白Elisa

短桿狀馬賽 右旋糖酐鐵5-羥色受體4Elisa

香菇 醋酸丁酸纖維5-羥色受體1BElisa

巴氏醋桿 醋酸丁酸纖維眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子Elisa

明膠樣鏈霉 醋酸丁酸纖維精氨酸脫亞Elisa

紫丁香蘑 醋酸丁酸纖維色氨酰tRNA合成Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)