兔羊膜胚胎原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：兔原代羊膜胚胎細(xì)胞 WISH(人羊膜細(xì)胞) 293ET 人胚細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞） 1ml/T75 IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞 SiHa 人頸鱗癌細(xì)胞 人原代微血管周細(xì)胞

兔羊膜胚胎原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

兔胚胎羊膜細(xì)胞分離自羊膜組織；羊膜為單層上皮細(xì)胞互相連接構(gòu)成的薄膜。單層上皮細(xì)胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長發(fā)育，羊膜與絨毛密切緊貼，形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴大而呈半透明的薄膜，無血管，富有韌性（胎膜也就是羊膜腔的囊壁）。羊膜腔內(nèi)充滿的液體為羊水。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面，并不深入胎盤組織中，隨著妊娠的進(jìn)展羊膜腔逐漸擴大，占據(jù)整個子宮腔，羊膜是胎膜最內(nèi)一層，是一層半透明的薄膜，與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內(nèi)層，與人眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性，厚0.02~0.5mm，在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為i、iii、iv、v、vii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份，正是這些成份使羊膜可以充當(dāng)“移植的基底膜"而發(fā)揮一種新的健康合適的基質(zhì)。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔羊膜胚胎細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔羊膜胚胎細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CSSTL1 中華鱉肺來源細(xì)胞  小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL  IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   MET Others Rat 小鼠原代前列腺成纖維細(xì)胞 兔原代胸主動脈平滑肌細(xì)胞

CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted 0.5mgCCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T細(xì)胞表達(dá)和分泌的調(diào)節(jié)因子抗原

HEXA Protein Human 重組人 Hexosaminidase A / HEXA 蛋白 (Subunit A, His 標(biāo)簽)

ICAM1重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

UBE2F重組人 UBE2F 蛋白 Protein

大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(PM4)試劑盒 ，英文名： PM4 ELISA Kit

Mouse ai myocardial aibody (AMA) ELISA Kit 小鼠抗心肌抗體(AMA)試劑盒

MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物

微管(microtubules)熒光染色試劑盒10次

ELISAKitAb大鼠抗促甲狀腺素受體抗體

兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒   兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒、兔型纖溶酶原激活物受體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔型纖溶酶原激活物試劑盒   兔型纖溶酶原激活物試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔型纖溶酶原激活物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔型纖溶酶原激活物試劑盒、兔型纖溶酶原激活物試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒   兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒、兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒   兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒、兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔羊膜胚胎原代細(xì)胞小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)試劑盒

Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羥孕酮(17-OHP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-Ag試劑盒人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?span>8(HDAC8)活性比色法定量試劑盒20次

humaESTcorepressor3,RCOR3ELISAKit人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

EFNA5重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白  Protein

乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)重組蛋白 Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)

IL17F重組人 IL-17F / IL17F 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標(biāo)簽)

NS2 Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。