商品介紹:
GS-4997是一個高的,有選擇性和強(qiáng)的ASK1抑制劑,在ASK1催化激酶中競爭ATP。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1448428-04-3 別名:GS-4997 純度:98.04% 分子量:445.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ASK1抑制劑(Selonsertib) | Selonsertib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
樟疫霉粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體Human RGS3(Regulator of G-protein signaling 3) ELISA Kit人抗增殖核抗原抗體(PCNA)
貝倫格勒座腔菌梨專化型粘蛋白4抗體Human RGS10(Regulator of G-protein signaling 10) ELISA Kit人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)
釀酒酵母v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體Human HMGB4(High mobility group protein B4) ELISA Kit人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T活化蛋白(TAP)
Phoma medicaginis var. medicaginis基質(zhì)金屬蛋白-10抗體Human PENK(Proenkephalin-A) ELISA Kit人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)
松乳菇突變型P53抗體Human RGS10(Regulator of G-protein signaling 10) ELISA Kit人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)
黃蓋蜜環(huán)菌蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體Human ARSA(Arylsulfatase A) ELISA Kit人抗胰島受體抗體(AIRA)
粉狀畢赤氏酵母基質(zhì)金屬蛋白-24抗體Human HMGB4(High mobility group protein B4) ELISA Kit人抗(AT)
黑絡(luò)丸巨噬甘露糖受體抗體Human RGS3(Regulator of G-protein signaling 3) ELISA Kit人抗眼肌抗體(EMAb)
釀酒酵母胃粘液抗體Human ATOH1(Protein atonal homolog 1) ELISA Kit人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)
枯草芽孢桿菌基質(zhì)金屬蛋白20抗體Human KLF14(Krueppel-like factor 14) ELISA Kit人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)
平臍蠕孢菌尿調(diào)節(jié)蛋白抗體Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)
根瘤菌肌增強(qiáng)因子2抗體Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)
枯草芽孢桿菌肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體Human PRSS2(Trypsin-2) ELISA Kit人抗血小板抗體(anti-PA Ab)
越南芽孢桿菌神經(jīng)母特異性轉(zhuǎn)移因子抗體Human IL17RB(Interleukin-17 receptor B) ELISA Kit人抗胸腺球蛋白(ATG)
釀酒酵母組織相關(guān)抗原HLA-B15抗體Human CDO1(Cysteine dioxygenase type 1) ELISA Kit人抗信號識別顆??贵w(SRP)
Gordonia蛋腺苷轉(zhuǎn)移抗體Human CYP2D6(Cytochrome P450 2D6) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)
腐生葡萄球菌Staphylococcus│saprophyticus 質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝蒙花苷
細(xì)極鏈格孢蒜生變種Alternaria│tenuissima var. alliicola 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分沒食子
無乳鏈球菌Streptococcus│agalactiae 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,進(jìn)口半硫鹽木犀草苷
ASK1抑制劑(Selonsertib)擬青霉 三氟甲磺酸鋰O型口蹄疫Elisa
白地霉 1,12-二溴十二烷立克次氏體Elisa
斑玉蕈(真姬菇、蟹味菇) D-潘糖高密度脂蛋白Elisa
赫氏埃希氏 溴化乙酰-β-甲基低密度脂蛋白Elisa
釀酒酵母 2,5-二甲氧基二白蛋白Elisa
矩圓黑盤孢 (3--2-羥基)基化銨 溶液谷轉(zhuǎn)氨Elisa
蠟樣芽胞桿 2--4-基吡啶髓過氧化物Elisa
海泥黃桿 4-氟溴乙基苯肉堿Elisa
暗色節(jié)菱孢* 環(huán)戊基溴化鎂白介1βElisa
枯草芽孢桿 鄰苯異酸酯白介12Elisa
變幻青霉 偏苯三酸三辛酯白介13Elisa
庫德里阿茲威畢赤酵母 酞菁鈷(II)轉(zhuǎn)化生長因子βElisa
大腸埃希 2-氟-4-甲氧基苯甲副結(jié)核分枝桿抗體Elisa
香菇 4-(三氟甲基)芐吻Elisa
干草鞘氨單胞 6-氨基煙酰腫瘤壞死因子βElisa