mTOR抑制劑(KU-0063794)公司*的產(chǎn)品：C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷4b2-茚酮 98%
C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷4d(S)-(-)-1-(4-氧苯) 98%
C5b(Human Complement fragment 5b) ELI

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：mTOR抑制劑(KU-0063794)

英文名稱：KU-0063794

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

臭曲霉環(huán)指蛋白113B抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型受體α4(CHRNα4)

雞傷寒沙門氏菌環(huán)指蛋白165抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型受體α3(CHRNα3)

豌豆根瘤菌環(huán)指蛋白186抗體Anti-FABP3 Antibody煙堿型受體α2(CHRNα2)

鴨溫?fù)P球蟲凋亡相關(guān)蛋白1抗體Anti-FABP3 Antibody煙堿型受體α1(CHRNα1)

糙皮側(cè)耳磷化S6核糖體蛋白抗體 (Ser240/244)Anti-FABP4 Antibody亞鐵螯合(FECH)

華麗閉核菌磷化Runx3抗體Anti-FABP4 Antibody亞硫鹽氧化(SUOX)

黑白铦囊蘑RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab14抗體Anti-FABP3 Antibody亞精合(SRM)

老人頭（梭柄蘑）磷化視網(wǎng)膜母瘤樣蛋白p107抗體Anti-FABP3 Antibody(PB0803)亞甲基四氫葉脫氫2(MTHFD2)

漢遜德巴利酵母漢遜變種磷化轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體Anti-FABP4 Antibody亞甲基四氫葉脫氫1(MTHFD1)

茄腐鐮刀菌環(huán)指蛋白148抗體Anti-FABP4 Antibody亞甲基四氫葉還原(MTHFR)

飲料  G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體Anti-FABP5 Antibody牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP1)

白乳菇成視網(wǎng)膜瘤基因抗體Anti-FABP5 Antibody牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)

Orbilia新朊蛋白抗體Anti-FABP5 Antibody血幼(HJV)

谷棒桿菌磷鞘裂解1抗體Anti-FABP5 Antibody血型糖蛋白E(GYPE)

土曲霉可溶性E選擇Anti-FABP6 Antibody血型糖蛋白C(GYPC)

居真菌細(xì)菌可溶性P選擇抗體Anti-FABP6 Antibody血型糖蛋白B(GYPB)

信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體蕁麻青霉Hela人子宮頸癌細(xì)胞

絲/蘇蛋白激40抗體黑根霉SMMC7721人肝癌細(xì)胞

T淋巴細(xì)胞激活蛋白抗體尖孢鐮孢菌（斜面）MCF-7人乳腺癌細(xì)胞

促黃體激誘導(dǎo)蛋白5抗體亮白曲霉(無法提供）T24人膀胱癌細(xì)胞
mTOR抑制劑(KU-0063794)查帕西斯瘤胃球 青霉敏感紙片O型口蹄疫Elisa

嗜果刀孢 炭疽桿診斷抗原胃抑Elisa

藍(lán)灰鏈霉 炭疽桿噬體O型口蹄疫VPI抗體Elisa

多噬香鞘氨單胞 炭疽桿疫苗甘氨酸脒基轉(zhuǎn)移Elisa

潮濕纖維單胞 戊烷脒堿性成纖維生長因子2Elisa

豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS1/2 PLET瓊脂基礎(chǔ)支原體抗體Elisa

克里布所類諾卡氏 指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)脂肪酸Elisa

黑曲霉 碳酸氫鈉瓊脂基礎(chǔ)甲狀腺球蛋白Elisa

類干酪乳桿 戊烷脒多粘B瓊脂基礎(chǔ)小反芻獸疫抗體Elisa

大腸桿 溶血（0.1%）赫氏瓊脂硫代巴比土酸反應(yīng)物質(zhì)Elisa

凍土毛霉 豆粉瓊脂藍(lán)舌病Elisa

費氏中華根瘤 堿性膽鹽瓊脂20羥二十烷四烯酸Elisa

HIV假病 YA194-5 堿性瓊脂平板胰蛋白原Elisa

灰葡萄孢 麥康凱瓊脂糜蛋白原Elisa

香菇 TTC-沙保羅培養(yǎng)基程序性死亡-1抗體Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)