JMJD2去甲基酶抑制劑(ML324)公司正在出售的產(chǎn)品：Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit 小鼠周期D1氟硅 GR,30.0-32.0%
MBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit 小鼠髓脂性蛋白 Standard for GC
TGF- Alpha(Mouse transforming growth factor

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
青霉Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-ST5 Antibody干擾α7(IFNα7)

香菇*Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAM Antibody干擾α6(IFNα6)

雷夫松氏菌PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α5(IFNα5)

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α4(IFNα4)

釀酒酵母APC標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α21(IFNα21)

枯草芽孢桿菌Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α2(IFNα2)

遠(yuǎn)青鏈霉菌Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody(PB0539)干擾α17(IFNα17)

卷枝毛霉卷枝變型Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAT2 Antibody干擾α16(IFNα16)

日本根霉Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAT2 Antibody干擾α14(IFNα14)

弗氏檸檬桿菌羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgMAnti-STAT3 Antibody干擾α13(IFNα13)

石耳*生物標(biāo)記的小鼠抗人IgMAnti-STAT4 Antibody干擾α10(IFNα10)

疣孢漆斑菌辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗人IgMAnti-STAT3 Antibody干擾α/β受體2(IFNα/βR2)

長毛木霉FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgMAnti-STAT2 Antibody干擾α/β受體(IFNα/βR1)

粉紅單端孢霉Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgMAnti-STAT5 Antibody干擾α(IFNα)

新平7317（平菇類）Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgMAnti-STAT5A Antibody肝脂(LIPC)

大腸埃希氏菌Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgMAnti-STAT5A Antibody肝臟磷果糖激(PFKL)

神經(jīng)內(nèi)分泌肽QRFP抗體細(xì)長賴芽胞桿菌人胰腺細(xì)胞MatchPair: 胰腺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物

RNA結(jié)合蛋白QK1抗體無色桿菌屬胃壁細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物

喹啉磷核糖基轉(zhuǎn)移抗體安達(dá)桿菌屬腎上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物

嗜性粒細(xì)胞顆粒關(guān)鍵堿性蛋白抗體副溶血弧菌乳腺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物
JMJD2去甲基酶抑制劑(ML324)鏈霉 澤瀉 K 23-醋酸酯

草木樨中華根瘤 11-去氧澤瀉B

蠟樣芽孢桿 1,3,5-三羥基咕噸酮

掘氏疫霉* 1,3,7-三羥基-9H-氧雜蒽-9-酮

黃曲霉 藍(lán)V

果生鏈核盤 13-羥基氧化小檗堿

泡盛曲霉 魯米諾單鈉鹽

櫟生青霉 3-O-阿魏?？崴?/span>

長柄鏈格孢 二甲苯藍(lán)FF

阿維鏈霉 4-O-阿魏?？崴?/span>

鼠傷寒沙門氏 苦參C

黑木耳 苦參X

硬結(jié)節(jié)桿 7,3'-二羥基-5'-甲氧基異黃酮

金龜子綠僵 苦參E

毛頭鬼傘 cis-宮部苔草酚C