支原體染色液公司正在出售的產(chǎn)品：14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC 熒光標記化14-3-3 ζ抗體IgG1-正丁-1-吡咯烷二(三氟磺酰)酰亞 98%
2,4-D/FITC 熒光標記2，4-二苯氧抗體IgG1-丁-3-咪唑雙三氟磺酰亞鹽 98%
4E-BP1/EIF4EBP1/FITC 熒光標記4E結(jié)合蛋白1抗體IgG1-丁-3-咪唑硫氫鹽 95%
4EBP1(phos

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
小白菊內(nèi)酯(標準品)英文名稱： Carbocistein;S-Carboxymethyl-L-cysteine乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白包裝100g

小駁骨（標準品）英文名稱： S-Benzyl-L-cysteine組蛋白H2B.s抗體包裝25g

小檗紅堿（標準品）英文名稱： L-Glutamic acid hydrochloride組蛋白去乙?；?+5+9抗體包裝5g

小檗堿(標準品)英文名稱： Nω-Nitro-L-arginine熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體包裝25g

小檗皮（標準品）英文名稱： Nalpha-Benzoyl-L-arginine卟膽原脫抗體包裝5g

小豆蔻明(標準品)英文名稱： L-Asparagine Anhydrous異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白抗體包裝25g

小茴香（標準品）英文名稱： L-Asparagine anhydrous肝癌衍生生長因子2抗體包裝5g

小薊（標準品）英文名稱： N'-Trityl-L-asparagine肝癌相關(guān)抗原57抗體包裝1g

小秦艽（標準品）英文名稱： L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester補體C3抗體包裝5g

小葉榕（標準品）英文名稱： L-Aspartic acid 1-methyl ester型流感病血凝抗體包裝25ml

纈草三酯英文名稱： L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride狀旁腺功能亢進蛋白2/分裂周期73抗體包裝5ml

薤白（標準品）英文名稱： S-Methyl-L-cysteine線粒體絲蛋白抗體包裝100g

辛弗林(標準品)英文名稱： S-Trityl-L-cysteine/鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白2抗體包裝25g

辛弗林鹽鹽(標準品)英文名稱： L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester熱休克蛋白β7抗體包裝5g

辛辣內(nèi)酯A（標準品）英文名稱： L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride/鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白3抗體包裝1ml

平常假絲酵母Candida│inconspicus 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標準品用于含量測定梅螺旋體試劑盒雷公藤;Triptolide

大麗花輪枝孢（棉花黃萎病菌）Verticillium│dahliae 質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR,二合物梅螺旋體試劑盒雷公藤紅;Celastrol

長裙竹蓀Dictyophora│indusiata 質(zhì)量規(guī)格：純度>99%,BR,可用于培養(yǎng)錨蛋白B試劑盒落新婦苷;Astilbin
支原體染色液麥根腐平臍蠕孢 二甲基二酸二甲酯生物Elisa

希瓦氏屬 3,5-二溴甲酯轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1Elisa

青春雙歧桿 2-硝基-9,9-二甲基芴絲蟲抗體IGgElisa

烏芝 1,6-己成纖維生長因子18Elisa

茄鏈格孢 奧沙拉秦鈉表面原性蛋白Elisa

哈里法克斯希瓦氏 2,3-吡啶二甲酸二甲酯正五聚蛋白2Elisa

剛果嗜皮 1,1'-聯(lián)萘羧肽B2Elisa

赭色擲孢酵母 2,3-二氨基血纖蛋白原γ鏈Elisa

黃蜜環(huán) 2,6-萘二磺酸鈉3－羥－3－甲戊二酸單酰還原Elisa

馬葡萄球 2,3-二甲酸去乙酰化Sirtuin-4Elisa

農(nóng)藥速測卡 5-氯-2-苯基-3H-咪唑-4-甲去乙?；疭irtuin-3Elisa

大腸埃希氏桿 3-氯-4-甲氧羰基苯基酸紅富鐵Elisa

大腸埃希氏 4-乙酰吡啶6磷酸果糖2激；果糖-2,6-二磷酸3Elisa

桿狀毛霉 五氟磷酸化MEK激Elisa

雜色曲霉 L-蘇氨酸P-CREBElisa