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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>>吖啶橙染色液

            吖啶橙染色液

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            • 所在地 上海市

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            更新時(shí)間:2022-04-21 15:31:54瀏覽次數(shù):261

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T
            貨號(hào) GOY-01X9838 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
            吖啶橙染色液公司*的產(chǎn)品:PSAP/PAP (human) 前列腺性抗體(人)3-氨-4-氧-N-苯苯酰 98%
            PSCA 前列腺干抗原抗體鄰氧苯 GR,99%
            PSD93 突觸后密度蛋白93抗體2-氨-4-硝苯 98%
            Phospho-PSD93 (Tyr340) 化突觸后密度蛋白93抗體2-氨-4-硝苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
            PSD95 突觸后密度蛋白95抗體對(duì)氧苯 AR,99.0%

            詳細(xì)介紹

            產(chǎn)品屬性:

            中文名稱:吖啶橙染色液

            英文名稱:

            產(chǎn)品規(guī)格:100T

            發(fā)貨周期:1~3天
            公司產(chǎn)品僅用于科研

            商品介紹:

            橙(Acridine Orange,AO)為一種熒光染料,該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長(zhǎng)為488nm,吸收波長(zhǎng)為515nm。它與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,復(fù)合物可發(fā)出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。因此,在熒光顯微鏡下觀察,橙可透過正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。

            儲(chǔ)存條件:4℃避光保存。長(zhǎng)期保存-20℃避光保存。

            有效期:一年。

            細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

            細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

            ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

            ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

            ③細(xì)胞骨架體系的研究;

            ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

            ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

            ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

            ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

            ⑧細(xì)胞工程.

            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

            一、分離與培養(yǎng):

            1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

            4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

            二、免疫熒光鑒定:

            1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

            2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

            3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

            4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

            5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

            6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            番瀉葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lead (IV) acetateF-box蛋白家族FBXO18抗體包裝25g

            翻白草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lead powderFRG2B蛋白抗體包裝5g

            反式茴香腦英文名稱: Lead(II) carbonate basicFAM71A蛋白抗體包裝25g

            返魂草(麻葉千里光)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leishman's stainFAM83F蛋白抗體包裝5g

            芳樟(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leptomycin B 1% solutonFBXL17蛋白抗體包裝1g

            防風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithium 3,5-diiodosalicylateFCHSD1蛋白抗體包裝1g

            防己諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithium bromideFBXL5蛋白抗體包裝5g

            防已(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithium metaphosphateFBXL12蛋白抗體包裝1g

            飛龍掌血根皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithium oxalateFBXL3蛋白抗體包裝25g

            飛揚(yáng)草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithium stearateF-box蛋白相關(guān)蛋白11抗體包裝5g

            非洲防己堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithium sulfate monohydrateFGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體包裝100g

            榧子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Threonic acid calcium salt成纖維生長(zhǎng)因子受體底物2抗體包裝25g

            粉萆薢(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Tyrosine disodium salt hydrateFNBP1L蛋白抗體包裝5g

            粉防己堿;漢防己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Luminol, sodium saltGATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體包裝100g

            楓香脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magenta-GalCD349抗體包裝25g

            檸檬明串珠菌Leuconostoc│citreum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品沙眼衣原體抗體試劑盒去氫駱駝蓬堿;Harmine?

            季氏畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR沙眼衣原體抗體試劑盒L-羥脯 ;L-Hydroxypro

            鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品沙漠猬因子試劑盒青蒿琥酯 ;Artesunate
            吖啶橙染色液馬來西亞鏈霉 RITA (NSC 652287)Smad同源物8Elisa

            糙皮側(cè)耳 WHI-P154Gremlin-1蛋白Elisa

            華盛頓腥擲孢 Dalcetrapib水痘-帶狀皰疹病抗體Elisa

            釀酒酵母 Entinostat (MS-275)腮腺炎病IgG抗體Elisa

            皺褶青霉 ZM 336372乙??贵wElisa

            硬結(jié)節(jié)桿 DAPT嘌呤霉敏感性氨肽Elisa

            杜搟氏屬 Darunavir信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1Elisa

            枯草芽孢桿 Safinamide Mesylate信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子5Elisa

            酒色紅菇 Deferasirox信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子8Elisa

            淡紫擬青霉 Balaglitazone抗Ri抗體Elisa

            變異鹽單胞 Atazanavir磷脂酰抗體Elisa

            尖孢鐮孢 PQ 401線粒體肽蛋氨酸亞砜還原Elisa

            黑木耳 LomeguatribL-谷氨酸Elisa

            禾生殼二胞 Lenalidomide羥甲基戊二酸單酰Elisa

            葡枝根霉 Pomalidomide胱天蛋白3Elisa 

            操作規(guī)程

            1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

            2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

            3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

            4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

            5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

            6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

            7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

            8、結(jié)果分析

            a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

            b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

             


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