PI3K γ和δ抑制劑（TG100-115）公司*的產(chǎn)品：CLDN1/FITC 熒光標(biāo)記緊密連接蛋白1抗體IgG芐嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3
ocludin-5/FITC 熒光標(biāo)記緊密連接蛋白-5抗體IgG草除靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98.5%
CLDN3/Claudin 3/FITC 熒光標(biāo)記緊密連接蛋白3抗體IgG多菌靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99%
CLDN4/Claudin 4/F

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3K γ和δ抑制劑（TG100-115）

英文名稱：TG100-115

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

白色球形孢囊菌Alexa Fluor 488標(biāo)記羊抗人IgAAnti-HOXB2 Antibody人抗單核抗體(AMA)

克魯弗酵母Alexa Fluor 488標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HOXB2 Antibody人抗單核抗體(AMA)

東方伊薩酵母 Alexa Fluor 488標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HOXB5 Antibody人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)

碳樣小單孢菌Alexa Fluor 488標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HOXD10 Antibody人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)

季也蒙邁耶氏酵母熒光Cy5.5標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HOXD8 Antibody人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)

矩圓黑盤孢熒光Cy5.5標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HRH4 Antibody人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)

沙氏倚囊霉熒光Cy5.5標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HSBP1 Antibody人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)

可可豆醋桿菌(親和純化) 牛IgMAnti-HR Antibody人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)

短小芽孢桿菌(HPLC純化) 雞IgGAnti-HOXD3 Antibody人抗增殖核抗原抗體(PCNA)

香魏菇(側(cè)耳)(親和純化) 雞IgMAnti-HSD17B11 Antibody人抗增殖核抗原抗體(PCNA)

雞腿菇(川雞3號(hào))(親和純化) 狗IgGAnti-HSP20 Antibody人抗IgE受體抗體

漆柄小孔菌(親和純化) 狗IgMAnti-HSPA14 Antibody人抗IgE受體抗體

釀酒酵母(親和純化) 羊IgMAnti-HSPA6 Antibody人抗IVIgG抗體

金色產(chǎn)色鏈霉菌(親和純化) 豚鼠IgGAnti-HSPA7 Antibody人抗IVIgG抗體

小單孢菌(親和純化) 豚鼠IgMAnti-HTR1E Antibody人抗心肌抗體(AMA)

布氏正青霉(親和純化) 馬IgGAnti-HTR3D Antibody人抗心肌抗體(AMA)

溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體露濕漆斑菌人黑色瘤細(xì)胞

SH2結(jié)構(gòu)含磷肌SHIP1抗體黑球漆斑菌人口腔鱗癌細(xì)胞

SLFNL1抗體魯氏毛霉人胰腺星狀細(xì)胞

新朊蛋白抗體多型孢毛霉人陰道上皮細(xì)胞
PI3K γ和δ抑制劑（TG100-115） 纖維堆囊 4,10-Aromadendranediol

膠凍樣類芽孢桿 4-(3,4-Dimethoxyphenyl)-3-butene

假單胞屬 4(15),5,10(14)-Germacratrien-1-o

大腸埃希氏 3'-Methoxydaidzein

Bacteroides sartorii 2,3-二羥基-12-齊墩果烯-28-酸

Knoellia 3-Epiglochidiol diacetate

越南伯克霍爾德氏 3',5,5',7-Tetrahydroxy-4',6-dime

乳酸鐮孢 3,19-Dihydroxy-6,23-dioxo-12-urs

有孢圓酵母 3,10-Dihydroxydielmentha-5,11-di

弗雷德里克斯堡假單胞 2''-O-甲基異甘草苷元

慢生海桿狀 24-Methylenecycloartan-3-ol

相思根瘤 2,7-二氫高桐春

莫氏克羅諾桿 2',5,6',7-Tetrahydroxyflavanone

凝結(jié)芽孢桿 2',5,6',7-Tetraacetoxyflavanone

擬可可毛球二孢 2',4'-Dihydroxy-2,3',6'-trimetho 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)