網(wǎng)織紅細(xì)胞染色液公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-HSP27 (Ser15) /FITC 熒光標(biāo)記化熱休克蛋白27抗體IgG對苯磺,—水 CP，98%
Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 熒光標(biāo)記化熱休克蛋白27抗體IgG對苯磺,—水 ACS,≥98.5%
Phospho-HSP27 (Ser82)/FITC 熒光標(biāo)記化熱休克蛋白27抗體IgG對酮 97%
Phospho

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)辛脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Histidine艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體包裝5g

細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Alanine艾滋病病抗體包裝25g

夏佛塔苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Tyrosine艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體包裝1g

夏枯草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Tyrosine磷化組蛋白H3抗體包裝1g

夏天無（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Glutamic acid短鏈L-3羥烷基脫氫抗體（小鼠，大鼠）包裝25g

仙鶴草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Glutamic acid同源盒蛋白HOXD10抗體包裝5g

仙鶴草酚B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Glutamic acidHHIP樣蛋白1抗體包裝100ml

仙茅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Glutamic acid monohydrateHOXA10抗體包裝1g

仙茅苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sarcosine 促黃體生成受體抗體包裝25g

仙人掌（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glycyl-DL-leucineHER2受體抗體(N端)包裝5g

纖細(xì)薯蕷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： AlliinHER2受體抗體包裝100g

相思子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-ProlineA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝25g

相思子堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Valine人絨毛膜促性腺激α亞基/hCG α 抗體包裝5g

香草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱：  L-Leucine 乙酰肝抗體包裝1mg

香橙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Leucine組蛋白H3樣蛋白抗體包裝1g

嗜熱紅短芽孢桿菌Brevibacillus│thermoruber 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白A試劑盒連翹苷;Forsythin

陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ試劑盒魯斯可皂苷元;Ruscogenin

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫核糖核試劑盒蘆薈苷;barbaloin
網(wǎng)織紅細(xì)胞染色液麥克默多生孢八疊球 5-硝基靛酸化脾臟酪氨酸激Elisa

球形芽孢桿 2-氯甲酯抗壞血酸過氧化物Elisa

短芽孢桿 5-硝基-1,2,4-苯補(bǔ)體3A受體1Elisa

水單胞 2-甲基-5-吡啶酸頻吶酯抗心肌IgM抗體Elisa

紅曲霉 2-硝基-1，4-苯二甲酸肌聚多糖-β基因Elisa

Tardiphaga 六氫鄰苯二甲酸肌聚多糖-a 基因Elisa

 Phytophthora syringoe 3-甲氧基肉桂酸生長分化因子8Elisa

草菇 苯乙雙胍鹽酸鹽HIV核心抗原P24Elisa

梭孢環(huán)柄菇 2-氯苯甲酰G蛋白偶聯(lián)雌受體1Elisa

Bacillus humi  2,4-二磺酰氯鈣調(diào)神經(jīng)磷酸Elisa

松樹土類芽孢桿 N-苯甲酰-L-谷氨酸固受體Err2Elisa

大腸埃希氏 奎寧磷酸糖異構(gòu)Elisa

博斯氏屬 2-甲基乙酰乙酸乙酯基孔肯尼亞病抗原Elisa

芽孢桿屬 3,5-二甲基異惡唑-4-酸頻哪酯心營養(yǎng)樣因子1Elisa

剛毛絲毛伏革 2-溴異戊酸乙酯銅鋅過氧化物岐化Elisa