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            mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)

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            • mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)

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            更新時(shí)間:2022-05-07 15:01:45瀏覽次數(shù):270

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
            貨號(hào) GOY-01X10749 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 OSI-027
            mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)公司*的產(chǎn)品:BTC(Human beta cellulin) ELISA Kit 人β732強(qiáng)苯烯陽離子交換樹脂 AR
            FETU-A(Human Fetuin A) ELISA Kit 人胎球蛋白A3-氨丁 98%
            HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor) ELISA Kit 人胎盤核糖

            詳細(xì)介紹

            公司產(chǎn)品僅用于科研

            細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

            細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

            ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

            ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

            ③細(xì)胞骨架體系的研究;

            ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

            ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

            ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

            ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

            ⑧細(xì)胞工程.

            產(chǎn)品屬性:

            中文名稱:mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)

            英文名稱:OSI-027

            產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

            發(fā)貨周期:1~3天

            商品介紹:

            OSI-027是mTORC1和mTORC2選擇性抑制劑,IC50為22nM和65nM,比對(duì)PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kγ和DNA-PK的抑制性高100倍。

            注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

            CAS號(hào):936890-98-1

            純度:98.15%

            分子量:406.44

            儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

            一、分離與培養(yǎng):

            1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

            4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

            二、免疫熒光鑒定:

            1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

            2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

            3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

            4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

            5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

            6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            操作規(guī)程

            1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

            2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

            3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

            4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

            5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

            6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

            7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

            8、結(jié)果分析

            a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

            b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

            矩圓黑盤孢腎結(jié)合蛋白抗體Anti-DKK2 Antibody載脂蛋白A2(APOA2)

            科羅拉多擬無枝菌RET指蛋白樣2/3抗體Anti-DLD Antibody(PB0608)載脂蛋白A1(APOA1)

            釀酒酵母RFESD蛋白抗體Anti-DLG1 Antibody(PB0592)甾-O-酰基轉(zhuǎn)移2(SOAT2)

            灰色鏈霉菌灰色亞種胰島再生因子β抗體Anti-DLG4 Antibody甾-O-?;D(zhuǎn)移1(SOAT1)

            莢膜紅細(xì)菌環(huán)指蛋白160抗體Anti-DLG3 Antibody運(yùn)動(dòng)因子相關(guān)蛋白1(MRP1)

            微桿菌屬視黃脫氫13抗體Anti-DLG4 Antibody(PB0859)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白2(SMN2)

            辣椒盤孢環(huán)指蛋白75抗體Anti-DLL1 Antibody孕烷X受體(PXR)

            橙鱗傘8RIT1蛋白抗體Anti-DLL3 Antibody孕免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)

            大腸埃希氏菌環(huán)指蛋白19B抗體Anti-DLL4 Antibody孕(Pg)

            橙灰紫旋鏈霉菌胰島β生長因子抗體Anti-DMRT1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白4(TMOD4)

            腸沙門氏菌腸亞種波恩血清型環(huán)指蛋白149抗體Anti-DNAJA2 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)

            地衣芽孢桿菌心臟蛋白磷1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體Anti-DMD Antibody(PB0292)原肌球調(diào)節(jié)蛋白2(TMOD2)

            烏洛托品甲速測管環(huán)指蛋白180抗體Anti-DNAJA1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白1(TMOD1)

            茶藨子葡萄座腔菌環(huán)指蛋白123抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白4(TPM4)

            弗雷德里克斯堡假單胞菌軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白3(TPM3)

            豇豆慢生根瘤菌環(huán)指蛋白210抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白2β(TPM2)

            蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

            微小鏈霉菌Streptomyces│parvulus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

            : 205234資源名稱: 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
            mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)冷海水黃桿 2-氨基-3-神經(jīng)型一氧化氮合成Elisa

            乳白居真細(xì) 酚紅葡萄糖肉湯偽狂犬病病GPI抗體Elisa

            Paraburkholderia contaminans 硝酸鹽肉湯偽狂犬病GB抗體Elisa

            弗雷德里克斯堡假單胞 代硅烷偽狂犬病GE抗體Elisa

            雞傷寒沙門氏 動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)熱休克蛋白90Elisa

            煙色紅曲霉 木糖-明膠培養(yǎng)基圓環(huán)病Elisa

            乳酸克魯維酵母 (4S,4'S)-2,2'-(戊烷-3,3'-二基)雙(4-芐基-4,5-二氫惡唑)副豬嗜血桿Elisa

            天花板節(jié)桿 4-芐溴非洲豬瘟Elisa

            玫瑰小雙孢 4-苯基-1,2,4-三唑烷-3,5-二酮口蹄疫A型抗體Elisa

            Leucostoma niveum 4-聯(lián)苯結(jié)蛋白Elisa

            匿名曲霉 芐基溴化鎂圓環(huán)病2型抗體Elisa

            大腸埃希氏 3-甲氧基-1-轉(zhuǎn)化生長因子Elisa

            可可鏈霉可可亞種 4-氟苯基乙硫生長因子Elisa

            生孢梭 檸檬酸酯清道夫受體Elisa

            蘋果雙殼 5-基口蹄疫病IgA抗體Elisa

             


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