立克次體染色液(改良Macchiavello法)公司*的產(chǎn)品：MGMT /FITC 熒光標(biāo)記O6鳥(niǎo)嘌呤DNA轉(zhuǎn)移抗體IgG雙十二烷二溴化銨 98.0%
MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光標(biāo)記層粘連蛋白受體1抗體（N端）IgG十烷溴化銨 99%
MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光標(biāo)記層粘連蛋白受體1抗體（C端）IgGN--N-（2-羥-3-磺）-3'5-二氧苯鈉鹽 9

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：立克次體染色液(改良Macchiavello法)

英文名稱(chēng)：

產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

藤黃短小桿菌鹽轉(zhuǎn)運(yùn)三磷腺苷抗體Human MAN1A2 ELISA Kit小鼠

蘇云金芽胞桿菌櫪木亞種精tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體Human MAP4K4 ELISA Kit小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒

南方鹽單胞菌共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體Human MAP7 ELISA Kit小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒

疣孢鏈霉菌孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體（自閉癥相關(guān)蛋白1）Human MAN2B2 ELISA Kit小鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒

聚生殼菌脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體Human MANBAL ELISA Kit小鼠組織蛋白去乙?；?(Hdac2/Yy1bp)免疫試劑盒

傳染性法氏囊病病芳香基硫酯H抗體Human MAP7 ELISA Kit小鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒

青霉屬溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體Human MAP4K5 ELISA Kit小鼠組蛋白脫乙酰(HDAC1)免疫試劑盒

水稻節(jié)桿菌載脂蛋白1抗體Human MANEA ELISA Kit小鼠組蛋白去乙?；?(HDAC4)免疫試劑盒

暗黑鏈霉菌突觸融合結(jié)合蛋白6抗體Human MAP4K3 ELISA Kit小鼠組蛋白去乙酰化3(HDAC3)免疫試劑盒

挪威假絲酵母精1抗體Human MALT1 ELISA Kit小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒

平滑假絲酵母腺苷激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human MAML1(Mastermind-like protein 1) ELISA Kit小鼠組(HIS)免疫試劑盒

盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7抗體Human MAML3 ELISA Kit小鼠總蛋白C(TPC)免疫試劑盒

中國(guó)臺(tái)灣假黃單胞菌磷化鈉ATPα1多肽抗體Human MAN2B2 ELISA Kit小鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒

小孢鏈霉菌Na+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體Human MAN1A2 ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒

磚紅鐮刀菌肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體Human MANBAL ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒

大腸埃希菌脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白7抗體Human MANEA ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒

彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR表皮活化肽因子試劑盒鹽伊立替康

云芝Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR表皮生長(zhǎng)因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7試劑盒愈創(chuàng)木酚

溶血不動(dòng)桿菌基因型4Acinetobacter│haemolyticus/genospecies 4 質(zhì)量規(guī)格：AR,≥99%表皮生長(zhǎng)因子受體2試劑盒氧化石蒜堿
立克次體染色液(改良Macchiavello法)茶葉枯炭疽盤(pán)孢* N-代酞酰亞凝血因子ⅩⅢElisa

立枯絲核 苯基環(huán)酮神經(jīng)特異性烯化Elisa

環(huán)帶青霉 鄰氨基乙酰苯糖蛋白β5Elisa

灰平鏈霉 N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐酯血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子CElisa

文昌小單孢 6-溴異喹啉異檸檬酸裂解Elisa

產(chǎn)腸大腸埃希氏 1,2,3,4-四氫化喹喔啉抗ENA抗體Elisa

古巴光蓋傘* 1-芐基-3-甲基-4-酮傳染性胃腸炎病抗體Elisa

釀酒酵母 2-乙?；?4-噻吩精合成Elisa

藤黃微球 2,7-二甲氧基萘內(nèi)皮酯Elisa

芽胞桿 4--7-三氟甲基喹啉鈣蛋白Elisa

彩色豆馬勃 4-氟-2,3-二酮犬細(xì)小病IgA抗體Elisa

死亡谷芽孢桿 5-溴-1-戊肥大蛋白1Elisa

魔鬼弧 4,5－二甲基－3,6－二噠一氧化氮合運(yùn)輸因子Elisa

黃桿屬 5-甲基-3-氨基-2-吡啶α1-防御Elisa

大孢鏈霉 5-甲基-3-氨基-2-吡啶組蛋白脫乙?；?Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)