尼氏小體染色液公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-P53 (Thr81) 化腫瘤抑制因P53抗體N，N′-亞雙烯酰 for electrophoresis, ≥99.0% (T)
phospho-p53BP1(Ser25/29) 化p53結(jié)合蛋白1抗體N，N′-亞雙烯酰 for molecular biology, ≥99.0% (T)
WIG-1 p53活化因608單克隆抗體 嗎啉磺,一水

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

Oleanolic acid-3-O-β-D-gluc...英文名稱： Hematin磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝1ml

Peritassine A英文名稱： PEG 800磷化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體包裝25ml

Pinocembrin 7-O-(3''-galloy...英文名稱： QuinestrolEpsin2B蛋白抗體包裝5ml

Presapogenin CP4英文名稱： Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom表皮生長因子抗體包裝1g

Prosapogenin CP6英文名稱： Propidium iodide表皮生長因子樣蛋白8抗體包裝5g

Raddeanoside 20英文名稱： Sodium dodecylbenzenesulfonateE3泛連接抗體包裝1g

Sapindoside A英文名稱： Sodium silicate hydrate小鼠抗表皮生長因子抗體包裝200mg

Smyrindioloside英文名稱： Bluo-Gal抗表皮生長因子抗體包裝1g

Thonningianin A英文名稱： Disodium hydrogen phosphate dihydrate內(nèi)皮受體蛋白酪激A2+A3+A4抗體包裝250mg

Tokinolide B英文名稱： Neutral Protease from Bacillus polymyxa磷化內(nèi)皮受體蛋白酪激A2+A3+A4抗體包裝5g

Triptonine B英文名稱： PEG 200磷化內(nèi)皮受體蛋白酪激A3+A4+A5抗體包裝25g

α-倒捻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sodium carbonate, decahydrate轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體包裝5g

α-蒎烯英文名稱： Aluminum oxide, activeE選擇抗體包裝1g

α-乳香英文名稱： D-Tartaric acid hydrate大腸桿菌耐熱性腸抗體包裝5g

α-石竹烯英文名稱： Indole泛激活E1抗體包裝1g

都柏林沙門氏菌Salmonella│dublin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品四氫生物蝶呤試劑盒人參皂苷CK;20(S)-Ginseno

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%四連接試劑盒人參皂苷F2;Ginsenoside F

明膠樣鏈霉菌Streptomyces│gelaticus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品死亡相關(guān)蛋白1試劑盒人參皂苷F1;Ginsenoside F
尼氏小體染色液黑腐皮殼 磷酸苯基酯粘蛋白1抗體Elisa

長枝木霉 3′,4′-二氯苯乙酮脫嘌呤脫嘧啶核酸內(nèi)切1抗體 Elisa

褐離褶傘 丁酸己酯博卡病IgG抗體Elisa

地生鱗傘 4-正戊基博卡病IgM抗體Elisa

釀酒酵母 (S)-(-)-1-苯基乙酮酸羧化Elisa

雙孢蘑菇 酚磺乙磷酸A1Elisa

錐形赤褶菇2-2 2-氨基-3-甲基-5-氟吡啶絡(luò)氨酸激受體-1Elisa

蒂蓋姆頭珠霉 環(huán)己溴氫酸鹽抗腦血管內(nèi)皮抗體Elisa

豬丹絲 聚二環(huán)氧乙烷甲基肌酐Elisa

盤長孢狀盤孢 2,5-二氟苯磺酰氯煙曲霉IgG抗體Elisa

聚紅粉端孢霉 2-(2'-羥基-3',5'-二叔戊基苯基)苯并三唑鋅指蛋白20Elisa

淡紫褐鏈霉 5-氯-3-甲基吡啶-2-羧酸肝Elisa

根瘤 1,2:5,6-雙鄰異亞基-alpha-D-異構(gòu)呋喃糖鋅指蛋白288抗體Elisa

根瘤 氯苯胍鹽酸鹽抗人組織谷酰轉(zhuǎn)移分泌型IGA抗體Elisa

*冬蟲夏草 2,2-二甲基-5-(2,5-二氧基)戊酸胰彈力蛋白Elisa