51種酪氨酸激酶抑制劑（Tyrphostin A9）公司正在出售的產(chǎn)品：AGER/RAGE/Cy3 熒光Cy3標(biāo)記晚期糖化終末產(chǎn)物特異性受體抗體IgG十二烷硫鈉 ACS
Aggrecan/FITC 熒光標(biāo)記軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗體IgG鈉 99%
Aggrecan2/ADAMTS-5/FITC 熒光標(biāo)記軟骨蛋白聚糖抗體IgG鈉 AR,99%
Agrin/FITC 熒光標(biāo)記聚集蛋白抗體

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

耐冷冷桿菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白4（抗原）Anti-CACNA2D4 AntibodyTBC1域家族成員10C(TBC1D10C)

扣囊復(fù)膜孢酵母小鼠胎盤生長因子（多肽抗原）Anti-CACNA2D4 AntibodyTATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子2(TAF2)

淡紫擬青霉胎盤生長因子（多肽抗原）Anti-CACNB3 AntibodyTATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子13(TAF13)

牛奶類芽胞桿菌人胎盤生長因子（多肽抗原）Anti-CACNG2 AntibodyTATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子1(TAF1)

藍色小單孢菌蛋白磷酯-1（抗原）Anti-CACNG4 AntibodyTATA盒結(jié)合蛋白(TBP)

灰樹花骨成型蛋白受體1A抗原Anti-CACNG3 AntibodyTaperin蛋白(TPRN)

側(cè)耳木霉D型-過氧化活化增生受體(多肽）Anti-CACNG1 AntibodyTAO激3(TAOK3)

梨形毛霉蛋白質(zhì)磷-2A（抗原）Anti-CACNG7 AntibodyTAO激2(TAOK2)

榆生玉蕈B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原Anti-CACNG5 AntibodyTAO激1(TAOK1)

毛霉屬蛋白磷酯-2B 催化亞單位（抗原）Anti-CACTIN AntibodyTANK結(jié)合激1(TBK1)

羽扇豆根瘤菌孕激受體（抗原）Anti-CAD AntibodyTalpid3蛋白(Talpid3)

蘭灰鏈霉菌早老蛋白-1（抗原）Anti-CACTIN AntibodyTalanin蛋白(TALN)

淡紫擬青霉早老蛋白-1（S182）Anti-CADM2 AntibodyTafazzin蛋白(TAZ)

芽孢桿菌屬癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠)Anti-CALB2 AntibodyS抗原(SAG)

枯草芽孢桿菌癌易感基因1抗原Anti-CADM4 AntibodySyntabulin蛋白(SYBU)

淡紫青霉突觸后密度蛋白95（抗原）Anti-CAF1B AntibodySynleurin蛋白(SLRN)

原鈣粘蛋白β4抗體Deinococcusaerolatus雞巨噬細(xì)胞

原鈣粘蛋白γ10抗體Oceanicolagranulosus人血管平滑肌細(xì)胞

原鈣粘蛋白γA4抗體Oceanicolabatsensis人氣道平滑肌細(xì)胞

原鈣粘蛋白γA2抗體Citreicellaaestuarii人主動脈血管平滑肌細(xì)胞
51種酪氨酸激酶抑制劑（Tyrphostin A9）阪崎氏年輕泰坦桿(阪崎克羅諾桿) 3,4,5-氧基肉桂酸

嗜酸寡養(yǎng)單胞 沒食子酸乙酯

大腸埃希氏桿 2,4-二羥基苯乙酮

PET-24a 2,4-二羥基二苯甲酮

閃孢巴克斯霉 2-羥基-4’-甲氧基二苯甲酮

枯斑擬盤多毛孢 反-4-甲氧基肉桂酸

鐮刀屬 4-甲氧基肉桂酸

枝鏈霉 4,5-二基咪唑

平臍蠕孢 2--1-甲基代吡啶

水生黃桿 6--1-羥基苯并三氮唑

糾纏青霉 Barbacarpan

便攜式激光測距儀 矮陀陀酰堿 A

支氣管敗血波氏 Anhydrotuberosin

脂節(jié)擔(dān) 苦杏堿 A

短芽孢桿 Adynerigenin β-neritrioside