泛JAK抑制劑(Pyridone 6)公司正在出售的產(chǎn)品：Annexin VI/FITC 熒光標(biāo)記膜粘連蛋白 VI抗體IgG硝鈉 GR
Anopheles stephensi protein 1/FITC 熒光標(biāo)記按蚊抗體IgG硝鍶 CP,99.0%
ANP/FITC 熒光標(biāo)記抗心鈉肽（心鈉）抗體IgG硝鍶 ACS, ≥99.0%
Anthrax/FITC 熒光標(biāo)記抗體IgG硝鍶 SP

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

青枯假單胞菌CC趨化因子受體3抗原Anti-CD177 AntibodyRIO激3(RIOK3)

福山淺黃酵母表面趨化因子受體2A抗原Anti-CD1E AntibodyRIO激2(RIOK2)

小葉相思根瘤菌表面趨化因子受體4抗原Anti-CD1B AntibodyRIO激1(RIOK1)

不高雙孢菌表面趨化因子受體6抗原Anti-CD1C AntibodyRififylin蛋白(RFFL)

藍(lán)微褐鏈霉菌表面趨化因子受體6抗原Anti-CD200 AntibodyRhoGDP解離抑制因子α(ARHGDIα)

三孢布霉CC趨化因子受體7（多肽）Anti-CD200R1 AntibodyRho蛋白2(RHPN2)

球孢白僵菌CXCL10趨化因子10/干擾誘導(dǎo)蛋白10抗原Anti-CD200R1 AntibodyRho蛋白1(RHPN1)

食砜節(jié)桿菌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（多肽抗原）Anti-CD209 AntibodyRhotekin2蛋白(RTKN2)

新城疫病CD10抗原Anti-CD226 AntibodyRhotekin蛋白(RTKN)

串珠鐮孢ZCWCC1抗原Anti-CD276 AntibodyRET原癌基因(RET)

釀酒酵母多配體蛋白聚糖1抗原Anti-CD3 zeta AntibodyREST輔抑制因子3(RCOR3)

中國(guó)蜜環(huán)菌黑色瘤粘附分子CD146抗原Anti-CD300C AntibodyREST輔抑制因子2(RCOR2)

血耳*肽N抗原Anti-CD302 AntibodyREST輔抑制因子1(RCOR1)

釀酒酵母CD14/內(nèi)受體抗原Anti-CD300E AntibodyReprimo蛋白(RPRM)

果生鏈核盤菌CD28抗原Anti-CD300LG AntibodyRepetin蛋白(RPTN)

ATCC 12980活化白粘附分子抗原Anti-CD300LF AntibodyRecepin蛋白(CIR)

泛激3抗體SphingomonasyunnanensisKM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株

蛋白激活受體4抗體Massiliaaerilata人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤

早老γ分泌2抗體多黏類芽孢桿菌人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)

絲/蘇蛋白激PIM3抗體紡綞形賴芽孢桿菌豬小腸上皮細(xì)胞
泛JAK抑制劑(Pyridone 6)*簡(jiǎn)單類諾氏 (+)-Puerol B 2"-O-glucoside

大腸埃希 Clausine Z

土壤伊薩酵母 (E)-2-[3,4-雙(乙酰氧基)苯基]乙基 3-O-(2,3,4,6-四-O-乙?；?BETA-

盤長(zhǎng)孢狀盤孢 Yuehgesin C

鐮刀 黃腐 D

燕麥?zhǔn)人嵛鞴蟻喎N* 中國(guó)臺(tái)灣三尖杉?jí)A

總狀共頭霉（可訂購(gòu)） Wilforol C

梅林青霉 葡萄 D

紫色紅曲 喜果苷

細(xì)孢毛霉 Uvedalin

葉生布勒擔(dān)子酵母 鉤藤甙元 C

金針菇雜19 Tupichilignan A

日本曲霉 雷藤二萜醌 B

無乳鏈球 Triptocallic acid D

 Burkholderia stabilis Vandamme et al.  Triptocallic acid A