真菌保存液Ⅰ公司正在出售的產(chǎn)品：wtp53/FITC 熒光標(biāo)記野生型p53單克隆抗體IgG硝烷 光譜級, ≥99%
p53BP1/53BP1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1抗體IgG硝烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.5% (GC)
p53BP1(Ser25/29) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化p53結(jié)合蛋白1抗體IgG兩性霉B 80%，750 μg/mg
phosph

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
斜頂菌BMP內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白抗體Human HAL ELISA Kit小鼠低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒

相思根瘤菌肝病NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體Human HAPLN4 ELISA Kit小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測免疫試劑盒

聚貪氏菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切抗體Human hamartin ELISA Kit小鼠蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體Human HAO1 ELISA Kit小鼠蛋白激B(PKB)免疫試劑盒

Nocardioides微管蛋白β輔助因子D抗體Human HAP1 ELISA Kit小鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒

非脫羧勒克菌鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體Human Harmonin ELISA Kit小鼠乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌有絲分裂蛋白BUB3抗體Human HARS2 ELISA Kit小鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒

球孢白僵菌p60TRP蛋白抗體Human HAT1 ELISA Kit小鼠膽固(CH)免疫試劑盒

赭色擲孢酵母博萊霉水解抗體Human GYG1 ELISA Kit小鼠單克抗體亞型鑒定免疫試劑盒

釀酒酵母短蛋白聚糖抗體Human GUCY1B3 ELISA Kit小鼠單核趨化蛋白5(MCP-5)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human GTSE1 ELISA Kit小鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒

耶納農(nóng)球菌巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體Human GTPBP5 ELISA Kit小鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體Human GUCY2D ELISA Kit小鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒

Bacillus tequilensis 骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體Human GUCY1A3 ELISA Kit小鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒

*正紅菇Bcl2相互作用蛋白1抗體（轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白）Human GUCY2F ELISA Kit小鼠大內(nèi)皮(Big ET)免疫試劑盒

豬丹絲菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體Human GUF1 ELISA Kit小鼠大動(dòng)脈平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRβ-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)序列包含蛋白試劑盒雙草鹽

優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質(zhì)量規(guī)格：BRβ抑制蛋白2試劑盒甘草堿

擬諾卡氏菌屬菌種Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：商品級β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白試劑盒沙蟾精
真菌保存液Ⅰ腐皮殼 咪唑并[1,2-A]吡啶-5-氨基雷帕霉靶蛋白C1Elisa

華麗側(cè)耳 (佛羅里達(dá)側(cè)耳) 鹽酸雷尼替丁3-酸Elisa

鏈球(不定種) 雷尼替丁堿連環(huán)蛋白β1Elisa

側(cè)耳 2,4-二苯丁酮周期依賴性激抑制因子2AElisa

巴博乳桿 6-羥基-5-硝基煙酸胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4Elisa

 ATCC 10224 3-氨基-5-甲基-6-噠酪氨酸Elisa

大腸埃希 2-氨基噻唑-5-甲酸甲酯周期依賴性激抑制劑P16INK4aElisa

香茅彎孢 頭孢替安鹽酸鹽腎母過度表達(dá)基因Elisa

蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 3H-1,2-苯并二硫-3-酮-1,1-二氧化物糖原合激3αElisa

分枝節(jié)桿 3--4-溴甲苯磷酸化糖原合成激3αElisa

鼠傷寒沙門氏 TA97a 4-溴間苯二酚抗酸性磷酸2bElisa

黃桿 2,4,7-三喹唑啉衰老相關(guān)β-半乳糖苷Elisa

墻壁圣格奧爾根 2--5-氟甲苯12羥二十烷四烯酸Elisa

枯草芽孢桿 異喹啉-3-甲酸5羥二十烷四烯酸Elisa

鐘器腐霉 5-巰基-1,2,3,4-四氮唑-1-甲基磺酸雙鈉鹽A型巴氏桿抗體Elisa