細(xì)胞膜紅色熒光染料(DiD)公司正在出售的產(chǎn)品：peripherin 外周蛋白抗體異丁(MIBC) 99%
PERK 蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體酰酯 CP，98%
Phospho-PERK (Thr980) 化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體異丁酮 >99.5%(GC)
PFK2/PFKFB3 6果糖激2抗體壬酚 GR
Phospho-PFK2 (Ser466) 化6果糖激2抗體壬酚(混合物) SU
F

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

蟾靈;蟾酥靈（標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 1,3-DihydroxynaphthaleneFMS樣酪激3配體抗體包裝250mg

長(zhǎng)春里寧英文名稱： 1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol堿性成纖維生長(zhǎng)因子9抗體包裝25g

長(zhǎng)春新堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,4-Cyclohexanedione原癌基因酪蛋白激FES抗體包裝100g

常春藤苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 1,4-Diaminoanthraquinone成纖維生長(zhǎng)因子16抗體包裝25g

常春藤苷D英文名稱： 1,4-Dihydroxyanthraquinone成纖維激活蛋白α抗體包裝5g

常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷英文名稱： 1,5-DiaminonaphthaleneFas相關(guān)磷1抗體包裝1g

常春藤皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 1,5-Dihydroxynaphthalene葉受體4抗體包裝25g

常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷英文名稱： 1,6-DihydroxynaphthaleneWnt信號(hào)受體蛋白抗體包裝5g

常山（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,8-Octanediol磷化載脂蛋白A1抗體包裝1g

巢脾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Acetonaphthone磷化載脂蛋白A1抗體包裝25g

朝藿定A(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Adamantanol磷化堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體包裝5g

朝藿定A1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 1-Bromonaphthalene脂肪酰解1抗體包裝100g

朝藿定C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Bromooctane外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體包裝25g

車前草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Methylimidazole富馬合抗體包裝500g

車前草（車前）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Ethylimidazole成纖維生長(zhǎng)因子21抗體包裝5g

: IFO14900FRIBP2535ATCC33849資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%生長(zhǎng)分化因子-9試劑盒七葉樹皂苷B;Aesculuside B

膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品生長(zhǎng)分化因子3試劑盒8-去乙?；釣鯄A;8-deacetyl

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%生長(zhǎng)分化因子2試劑盒羥基吳茱萸堿;Hydroxyevodia
細(xì)胞膜紅色熒光染料(DiD)孔曲霉 2,3-二氮雜萘二肽基肽ⅥElisa

枯草芽孢桿枯草亞種 3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)戊烷-2-基)甲苯胸苷酸磷酸化Elisa

炭黑曲霉 (R)-(-)-3-喹寧外膜蛋白AElisa

蠟狀芽孢桿 二異苯(異構(gòu)體混合物)精氨酸；絲氨酸豐富剪接因子1Elisa

弗氏檸檬酸 芐氧羰基-N-芐基-Beta-氨酸胸腎表達(dá)趨化因子Elisa

解脂復(fù)膜孢酵母（亞羅解脂酵母） 2-叔丁基環(huán)己基乙酸酯胱硫Elisa

鮑魚菇 反式4-甲基環(huán)己解脲支原體Elisa

粉紅單端孢霉 3-(3,4,5-氧基苯基)酸奈瑟Elisa

豬丹絲 雙(2,2,6,6－四甲基－4－基)癸二酸酯氮氧自由基磷酸絲氨酸Elisa

玉米大斑病 環(huán)磷酸羥基酮酸Elisa

厚垣孢普可尼亞 3-氟-4-氯苯乙3-磷酸甘油酸酯Elisa

米蘭農(nóng)霉 3-氟-4-氯苯乙屋塵螨變應(yīng)原Derp1 IgE抗體Elisa

墨西哥假黃色單胞 硫酸銨鋁,99.99％(metalsbasis)β-內(nèi)酰Elisa

枯草芽孢桿 1-甲基-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰新型抑癌基因X連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子-1Elisa

細(xì)黃鏈霉 2-(2-氯苯氧基)酸乳酸脫氫Elisa