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            技術(shù)文章

            磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白4(PEBP4)|ELISA指標

            閱讀:154          發(fā)布時間:2024-10-15

            基本信息

            • 名稱:磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白4(Phosphatidylethanolamine-binding protein 4),簡稱PEBP4。

            • 別名:CORK1、hPEBP4、Cousin-of-RKIP 1 Protein、PEBP-4、UNQ1933/PRO4408等。

            • 種屬:主要存在于人類(Homo sapiens)中,也可能存在于其他物種如大鼠、小鼠等。

            • 蛋白長度:通常為成熟蛋白的全長。

            • 表達區(qū)域:特定的氨基酸序列區(qū)域,如23-227氨基酸序列。

            結(jié)構(gòu)與功能

            • 結(jié)構(gòu):PEBP4由特定的氨基酸序列組成,具有特定的空間結(jié)構(gòu),這使得它能夠與磷脂酰乙醇胺等分子結(jié)合并發(fā)揮功能。

            • 功能:PEBP4在生物體內(nèi)可能參與多種生理過程,如細胞信號傳導、蛋白質(zhì)相互作用等。然而,關(guān)于其具體功能的詳細研究仍在進行中。

            ELISA技術(shù)基于抗原-抗體特異性反應(yīng)的原理,通過一系列的化學和物理步驟,將待測樣品中的PEBP4蛋白與相應(yīng)的抗體結(jié)合,并通過酶的催化作用使底物顯色,從而實現(xiàn)對PEBP4蛋白的定量檢測。

            PEBP4酶聯(lián)免疫檢測步驟

            1. 準備試劑:包括已包被PEBP4抗原或抗體的固相載體(如微孔板)、酶標記的抗體、底物溶液、洗滌液、終止液等。

            2. 包被:將PEBP4抗原或抗體包被在固相載體上,形成固相抗原或抗體。

            3. 加樣:將待測樣品加入已包被的固相載體中,使樣品中的PEBP4蛋白與固相抗原或抗體結(jié)合。

            4. 洗滌:去除未結(jié)合的物質(zhì),保留結(jié)合在固相載體上的PEBP4蛋白-抗體復(fù)合物。

            5. 加酶標抗體:加入酶標記的抗體,與固相載體上的PEBP4蛋白-抗體復(fù)合物結(jié)合,形成酶標抗體-PEBP4蛋白-抗體復(fù)合物。

            6. 再次洗滌:去除未結(jié)合的酶標抗體。

            7. 加底物:加入酶底物,酶催化底物顯色,顏色的深淺與樣品中PEBP4蛋白的含量成正比。

            8. 終止反應(yīng):加入終止液,停止顯色反應(yīng)。

            9. 讀數(shù):用酶標儀檢測各反應(yīng)孔的吸光度值,根據(jù)標準曲線計算待測樣品中PEBP4蛋白的含量。


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