技術(shù)文章
Masson染色|茁彩生物
閱讀:96 發(fā)布時間:2025-3-4Masson染色,也被稱為馬松染色,是一種經(jīng)典的結(jié)締組織染色方法,它利用不同分子量的染料滲透不同組織的特性,從而區(qū)分不同類型的纖維,主要用于顯示組織中的纖維和炎性因子。
Masson染色的原理主要基于不同組織成分對光線的吸收差異以及不同染色劑與組織成分的化學(xué)反應(yīng)。具體來說,該方法利用了一系列化學(xué)處理和不同染色劑的作用,使得膠原纖維產(chǎn)生色素沉淀,從而呈現(xiàn)出與周圍組織不同的顏色。小分子量的染料容易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織,而大分子量的染料則只能進入結(jié)構(gòu)疏松、滲透性高的組織。
Masson染色常用的染料包括蘇木精、麗春紅(或酸性品紅)、磷鉬酸、苯胺藍(lán)等。這些染料需要按照一定的比例進行配制,以獲得最佳的染色效果。例如,Regaud氏蘇木精的配制方法為:將蘇木精1g加入蒸餾水80ml內(nèi)加溫溶解,冷卻后加入95%酒精10ml和甘油10ml,放數(shù)日后即可應(yīng)用。Masson麗春紅酸性復(fù)紅液的配制方法為:麗春紅0.7g、酸性復(fù)紅0.3g加入蒸餾水99ml和冰醋酸1ml。
染色步驟
Masson染色的步驟通常包括切片脫蠟至水、鉻化處理(或去汞鹽沉淀)、染色、分化、復(fù)染、脫水、透明和封固等過程。具體來說:
將石蠟切片依次放入二甲苯、無水乙醇、90%乙醇等溶液中處理,以實現(xiàn)脫蠟至水。
進行鉻化處理或去汞鹽沉淀(甲醛固定的組織此步可略)。
用自來水和蒸餾水洗切片。
用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木精液染核5~10分鐘。
充分水洗,如過染可用鹽酸酒精分化。
用蒸餾水洗切片。
用Masson麗春紅酸性復(fù)紅液染色5~10分鐘。
以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
用1%磷鉬酸水溶液分化3~5分鐘。
不經(jīng)水洗,直接用苯胺藍(lán)或光綠液染色5分鐘。
以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
用95%酒精、純凈酒精、二甲苯進行透明處理,最后用中性樹膠封固。
染色結(jié)果
染色后,膠原纖維、粘液、軟骨等通常呈藍(lán)色(如使用光綠液染色則為綠色),胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)等呈紅色,胞核呈黑藍(lán)色。這樣,通過顏色差異可以清晰地區(qū)分不同類型的纖維和組織成分。