目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞 非電擊>> TurboChemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50支100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | ABG023-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 細(xì)胞培養(yǎng) |
Turbo Chemically Competent Cell
基因型：
F'proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnVgalK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1thi-1 Δ(hsdSmcrB)5
簡要說明：
Turbo 菌株是生長最快的大腸桿菌菌株。平板上6.5 小時可見克隆，營養(yǎng)液中搖菌 4-6小時可提取質(zhì)粒，缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)，提高了質(zhì)粒DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量；Turbo 菌株可嚴(yán)格控制 laclq的表達(dá)，可以克隆毒性基因；fhuA2 突變賦予Turbo 菌株對噬菌體 T1的抗性； lacZΔM15的存在使 Turbo可用于藍(lán)、白斑篩選。Turbo感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×108 cfu/μg DNA。
操作說明：
1. Turbo 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的 DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物） 并用手bo打 EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25 分鐘。
2. 42℃水浴熱激 45秒，迅速放回冰上并靜置 2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌SOC 或LB培養(yǎng)基，混勻后 37℃，200 rpm復(fù)蘇 60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取 100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng) 6.5 小時以上。
注意事項：
1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8 分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入目的 DNA 時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
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