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            高效液相色譜HPLC的操作流程

            閱讀:5503        發(fā)布時間:2022/2/28
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              高效液相色譜HPLC的操作流程:
             
              1.將已經(jīng)過濾并脫氣的流動相注入儲液罐;
             
              2. 用流動相沖洗金屬過濾器,然后將過濾器浸入儲液罐的流動相中;
             
              3. 將儲液罐放置在一定的高度,以避免由于搬運和其他操作人員的移動而造成不必要的跌落。
             
              4. 然后按以下順序依次啟動高效液相色譜儀:泵→檢測器→高效液相色譜軟件→按預(yù)先計劃的方法設(shè)置軟件參數(shù),如分析時間、檢測波長、流速等。
             
              5. 啟動泵,運行5分鐘,主要是為了排除系統(tǒng)中的氣泡,結(jié)束后關(guān)閉所有排氣閥;
             
              6. 然后按照預(yù)先計劃的速度,以固定的速率,如1mL/min左右,運行流動相,走基線,直到基線平穩(wěn),就可以在計算機軟件上進行監(jiān)視;
             
              7. 基線平穩(wěn)后,在軟件中設(shè)置樣品的運行參數(shù),如流速和分析時間等。分析時間會因樣品、流速、柱長等因素變化。
             
              8. 參數(shù)設(shè)置完畢后,將固定體積的樣品溶液注入進樣閥,然后在軟件中啟動注入命令,進樣器中的樣品溶液就隨流動相進入色譜柱;
             
              9. 通過軟件監(jiān)視各項讀數(shù),當檢測器檢測到樣品所有峰值,停止運行并設(shè)置新的進樣。在下一個樣品分析前,建議留出5-10分鐘,待流動相通過色譜柱,以便清洗之前樣品的殘留物;確認基線穩(wěn)定后,進行下一次注射。
             
              10. 分析結(jié)束后,先關(guān)閉檢測器,然后關(guān)閉泵,最后關(guān)閉軟件。

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